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目的:RhoJ/TCL是RhoGTPase超家族中Cdc42亚家族中的一员,由于其与小RhoGTPase成员TC10的高度同源性又可以称为TCL或者是TC10-like。研究发现RhoJ在内皮细胞中高表达,并且在内皮细胞的迁移和微管形成中发挥重要作用。RhoJ在调节肌动肌球蛋白收缩和焦点粘附的形成中也发挥着重要的作用。RhoJ在肿瘤形成中表达调控及其作用迄今为止并不清楚。乳腺癌是全世界女性最常见的癌症,是严重影响到女性身心健康甚至引发死亡的恶性肿瘤之一。如何预防与治疗乳腺癌已经成为当前的研究热点。利用基因芯片技术对乳腺癌基因谱进行分析,可将乳腺癌分为六个亚型:(1)Luminal A型(乳腺导管腔上皮细胞);(2)Luminal B型;(3) HER-2(human epidermal growth factor receptor-2)过表达型;(4) normal-like型(正常乳腺基因表达);(5)basal-like型(基底细胞样)(BLBC); (6) Claudin低表达型(CLBC)。BLBC是近年来研究较多的乳腺癌分子亚型,也被认为是乳腺癌预后最差的亚型。关于RhoJ和乳腺癌恶化之间是否存在着相关关系至今不为人知。我们前期的表达谱芯片结果提示,转录辅因子MRTF-A(心肌素相关的转录调控因子A,也称为MKL1)能够上调RhoJ。MRTF-A能介导上皮间充质转化(EMT),调控癌细胞的迁移和侵袭。我们提出假说,RhoJ表达可能在乳腺癌的恶化过程中被MRTF-A上调,并且参与乳腺癌细胞向周围组织及器官的浸润和转移,从而导致了乳腺癌的恶化。我们希望通过这一研究寻找治疗乳腺癌的新靶点。方法:我们选择了Luminal型乳腺癌细胞株MCF-7、T47D和Basal-like型乳腺癌细胞株MDA-MB-231、Hs578T。通过实时定量PCR(qPCR)检测比较这两种类型的细胞中不同RhoGTPase的mRNA水平。通过划痕(Scratch assay)和Transwell实验检测MDA-MB-231和Hs578T这两种高恶化的乳腺癌细胞中敲减掉不同基因后细胞的迁移和侵袭能力的变化。通过荧光素酶报告基因活性分析实验检测RhoJ的转录活性。通过染色质免疫共沉淀(ChIP)实验检测转录因子及组蛋白在RhoJ近端启动子上的富集量的变化。结果:RhoJ表达水平与乳腺癌恶化有着相关性。敲减掉RhoJ或ERG能够降低高恶化乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力。MRTF-A和ERG能够促进RhoJ的转录活性。TGF-β1上调RhoJ的mRNA水平,同时促进MRTF-A在RhoJ启动子上的富集,且这种富集依赖于ERG。恶化程度不同的乳腺癌细胞中,不同位点的组蛋白三甲基化(H3K9、H3K27、H4K20)在RhoJ基因启动子上的富集量不同,这一不同可能是通过去甲基化酶JMJD2B的催化作用实现的。结论:转录因子ERG通过招募MRTF-A,作用于RhoJ基因的启动子上促进基因的转录。而这一过程的实现可能是通过招募的组蛋白去甲基化酶JMJD2B作用于组蛋白,进而改变染色质结构,激活RhoJ的转录,从而影响到乳腺癌转移过程。因此,我们的研究为临床上干预乳腺癌提供了潜在的靶点。