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目的卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率在中西方均呈上升之势。尽管早期(I期)诊断的卵巢癌患者5年生存率高达90%以上,但鉴于该肿瘤发病隐匿,没有切实有效的早期诊断方法,导致了目前临床上70%患者在确诊时就已是晚期,其5年生存率仅为30%左右。因此,建立一种非创伤性的、简单准确的检测手段十分必要。miRNA是一种小的非编码RNA,通过碱基不完全配对调节靶基因表达。近期研究表明血浆miRNA的异常表达与肿瘤的发生发展有关。因此本研究旨在寻找出一组较为准确可靠的用于卵巢癌筛查、早诊及预后的血浆miRNA标志物。方法采用TaqMan低密度芯片(TLDA)的方法,筛选出候选的可作为卵巢癌诊断及预后预测的血浆miRNA标志物,并采用RT-qPCR方法进行验证。通过病例对照研究及详尽的统计分析,得到可用于卵巢癌诊断的血浆生物标志物,并评估候选的血浆miRNAs标志物对卵巢癌的诊断价值,比较其灵敏度和特异性。采用Kaplan-Meier曲线和Cox分析评价不同miRNA表达水平的生存状况,得到与不同分期的卵巢癌预后相关的指标。最终拟合出多个候选miRNA用于卵巢癌早期诊断、预后预测的联合应用模型。结果1.通过TaqMan低密度芯片方法筛选出在正常对照组、卵巢良性腺瘤组、卵巢癌早期组和晚期组四组之间血浆中有一定表达差异的30个候选miRNAs,用RT-qPCR方法在113例病例和30例对照血浆样本中进行验证,均可检测到有效表达。2.与健康对照组相比,卵巢癌样本中10个miRNAs呈高表达,2个呈低表达,差异有显著性,分别为 let-7e*、miR-184、miR-193b*、miR-363*、miR-770-5p、miR-141、miR-34a*、miR-200a、miR-205 和 miR-483-5p 和 miR-98、let-7f。3.miR-98的表达与卵巢癌患者生存时间相关,miR-141和miR-573的表达与早期卵巢癌患者生存时间相关,miR-21*和miR-643的表达与晚期卵巢癌患者生存时间相关。4.拟合7个有卵巢癌诊断价值且灵敏度和特异性良好的血浆miRNAs建立卵巢癌和正常人群中诊断卵巢癌的Logistic回归模型:logitP = 22.9879-1.235×miR34a*+ 1.122×let7f-0.366×miR141-1.542×miR200a-0.347×miR205-0.008×miR483-5p + 1.798×miR98,其 AUC-ROC 为 0.974(95%CI:0.923-0.995,P<0.0001)。结论1.利用TaqMan低密度芯片绘制血浆miRNAs表达谱简单可行。2.血浆miRNAs可作为卵巢癌诊断的标志物,具有潜在的应用价值。3.血浆miRNAs可作为标志物为卵巢癌患者的预后预测提供参考。4.多个血浆miRNAs联合应用检测可改善卵巢癌诊断的灵敏度和特异性,有望作为金标准CA125的辅助指标提高卵巢癌诊断的准确性。