食管癌是我国常见恶性肿瘤之一，严重危害我国人民的健康。我国食管癌90％以上的病理类型为鳞状细胞癌，治疗以手术及放化疗为主。食管癌恶性程度高，预后较差，总体五年生存率不超过15％。目前针对食管癌的预后评估系统，主要参照临床、病理分期，不能完全反映肿瘤的生物学行为，迫切需要寻找新的评估指标。另外，传统手术放化疗等治疗手段，难以有效控制食管癌，迫切需要寻找新的治疗靶点。　　免疫反应是肿瘤的重要特征之一，对肿瘤的发生、发展具有重要作用。肿瘤组织中存在多种免疫细胞的浸润，包括巨噬细胞，中性粒细胞，淋巴细胞，NK细胞等。肿瘤免疫反应是一把双刃剑，一方面免疫细胞能够通过细胞毒性反应清除肿瘤细胞，另一方面部分免疫细胞失去了杀灭肿瘤细胞的能力，甚至通过分泌蛋白酶及炎症因子促进肿瘤细胞侵袭转移。　　中性粒细胞是最血液中主要的白细胞成分，占白细胞总数的50-70％，在机体非特异免疫中发挥重要作用。中性粒细胞富含溶酶体，内含碱性磷酸酶、酸性水解酶等多种酶类，并能释放多种炎症因子。中性粒细胞是肿瘤组织中最主要的免疫细胞成分之一。中性粒细胞寿命短，在血液中存在数小时，便移至血管外，24-48小时后即发生凋亡，主要功能是吞噬和杀菌功能。以往认为:肿瘤微环境中的中性粒细胞浸润主要由组织缺血坏死、感染所继发，其与肿瘤进展的关系并未引起重视。最新研究发现，TAN在肿瘤进展过程中发挥重要作用。肿瘤微环境存在多种中性粒细胞的趋化因子。肿瘤微环境中的细胞因子，如IL-1能够明显延长中性粒细胞生存时间。中性粒细胞内的颗粒中包含大量的丝氨酸蛋白酶(NE，CG，PR3)及金属蛋白酶(MMP8，MMP9)，这些蛋白酶与肿瘤细胞的浸润密切相关。TAN在肿瘤癌变早期能够通过激活血管新生发挥重要促瘤作用。另外，也有研究报道，TAN能够通过分泌白介素或趋化因子等发挥肿瘤细胞杀伤作用。　　肿瘤组织中性粒细胞浸润临床意义方面的证据较少。Jensen等分析了121例肾细胞癌CD66b+中性粒细胞的浸润情况，发现TAN是肾癌死亡率的独立预测因素。Rao等报道:中性粒细胞瘤内浸润与结直肠癌的恶性表型及不良预后相关。食管癌属于腔内肿瘤，几乎所有食管癌都伴随炎症、溃疡、坏死，因而伴随中性粒细胞的浸润。而中性粒细胞在食管癌浸润的临床意义尚未见报道。　　通常认为的炎症反应是机体受到损伤时自然免疫系统为移除损伤或刺激原所作出的反应，包括免疫细胞的聚集和炎症因子的释放。肿瘤组织作为持续存在的刺激原，必然引起全身和局部的炎症反应的改变，而这些炎症反应参与肿瘤发生、增殖、转移、血管新生等各个阶段。血液中NLR被认为是非常重要的全身炎症反应的标志，在包括食管癌在内的多种实体瘤中与预后明显相关。但是肿瘤的炎症反应主要发生在肿瘤组织局部，因此，肿瘤局部炎症反应可能更直接的反映局部肿瘤细胞与免疫细胞的相互作用。CD8+淋巴细胞是肿瘤微环境中淋巴结细胞的主要成分，也是抗肿瘤免疫的主要效应细胞。因此，中性粒细胞/CD8+淋巴细胞比值可能代表肿瘤局部的炎症反应，具有重要的临床意义。目前未见该免疫指标在食管癌中临床意义的报道。　　研究目的:　　本课题主要研究肿瘤相关中性粒细胞及中性粒细胞/CD8+淋巴细胞比值在食管鳞癌中的临床意义，探讨上述免疫指标与食管鳞癌进展的关系。　　研究方法:　　1.病例收集:纳入2007年1月1日-12月31日于山东大学齐鲁医院行食管癌根治术的食管鳞癌病人。收集病例资料包括:患者的基本临床特征及预后情况。　　2.术后石蜡包埋病理组织切片行CD66b及CD8免疫组化双染色。　　3.Olympus IX71S1F-3倒置显微镜计数每高倍镜视野瘤内及瘤周CD66b+和CD8+细胞数目。　　4.采用卡方检验，t检验，K-M分析等统计方法对数据进行统计检验。　　研究结果:　　1.共纳入90例食管鳞癌病人，中位年龄为60.5岁（范围为42-78岁）;其中，72例(80％)男性，18例(20％)女性。胸上段10例、胸中段48例、胸下段32例。根据术后病理结果结合影像资料，参照第六版AJCC TNM分期系统进行分期，其中Ⅰ期18例、Ⅱ期41例、Ⅲ期31例。随访过程中，57例(63.3％)复发，63例(70％)死亡。中位无进展生存期31.7月（范围1.5-71.5月）。中位生存期45.5月（范围2.6-71.5月）。　　2.免疫组化指标:瘤内及瘤周CD66b+中性粒细胞密度的中位数分别为18.5/HPF(范围:0-387/HPF)及19/HPF(范围:0-247/HPF)。瘤内及瘤周CD8+淋巴细胞密度中位数分别为19/HPF（范围:0-122/HPF）及32/HPF(范围:0-200/HPF)。瘤内癌巢及间质均有CD66b+中性粒细胞及CD8+淋巴细胞浸润。瘤内癌巢中性粒细胞浸润密度中位数为8/HPF（范围:0-296/HPF），间质中性粒细胞浸润中位数为3.18/HPF（范围:0-90/HPF），P值=0.016。瘤内癌巢CD8+淋巴细胞浸润密度中位数为10.3/HPF（范围:0-96/HPF），间质CD8+淋巴细胞浸润中位数为3.78/HPF（范围:0-59.2/HPF），P＜0.001。瘤周与瘤内CD66b+中性粒细胞密度无明显差异(p=0.348)，而瘤周CD8+淋巴细胞数量明显多于瘤内(p＜0.001)。瘤及瘤周区域CD66b+中性粒细胞与CD8+淋巴细胞浸润无明显相关性。47.8％的食管鳞癌瘤内NLR≥1，37.8％的食管鳞癌瘤周NLR≥1。　　3.免疫组化指标与临床病理指标的相关性:瘤内中性粒细胞浸润增多与淋巴结转移(P=0.016)、TNM分期(P=0.013)及肿瘤复发(p=0.001)明显相关。高龄(＞60.5岁）食管癌瘤内CD8+淋巴细胞浸润增多。瘤周NLR增高与T分期增高(P＜0.001)及淋巴结转移(P=0.041)具有明显相关性，并与TNM分期有相关的趋势(P=0.053)。　　4.生存分析:单因素生存分析，显示瘤内CD66b+中性粒细胞浸润增多与无进展生存期及总生存期缩短相关。与无进展生存期相关的临床病理因素包括:肿瘤分化程度、T4分期、淋巴结转移及TNM分期。与总生存期相关的临床病理因素包括肿瘤部位、TNM分期、及术后辅助放疗。多因素生存分析显示瘤内中性粒细胞浸润增多、上段食管癌、TNM分期，是无进展生存期的独立预测因素。TNM分期，术后辅助放疗，瘤内中性粒细胞浸润增多是总生存期的独立预测因素。　　结论:　　1.食管鳞癌瘤内及瘤周均存在CD66b+中性粒细胞及CD8+淋巴细胞的浸润;　　2.瘤内CD66b+中性粒细胞浸润增多与淋巴结转移、TNM分期及复发相关，是无进展生存期及总生存期的独立预后预测因素。　　3.瘤周iNLR增高与T分期增高及淋巴结转移具有明显相关性，并与TNM分期相关有相关的趋势。　　4.明确中性粒细胞在肿瘤进展的作用及机制，有助于指导临床实践制定更个体化的治疗方案，并可能为食管鳞癌治疗提供新的靶点。