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肝苏颗粒是由赶黄草提取而成的单味成方制剂，具有降酶，保肝，退黄，健脾的功效，临床上常用于慢性活动性肝炎、乙型肝炎等的治疗，对阻断及逆转肝纤维化进程亦有一定疗效。赶黄草(Penthorum chinense Pursh)系虎耳草科(Saxifragaceae)扯根菜属（Penthorum）植物赶黄草的干燥地上部分。文献报道赶黄草主要含有黄酮和酚酸类化合物，药理活性广泛。为明确肝苏颗粒药效物质基础，从而完善其质量控制标准，本文结合肝苏颗粒的适应症，对肝苏颗粒进行了较为系统的研究，主要有以下几个方面：一、肝苏颗粒浸膏的化学成分研究在课题组前期对肝苏颗粒浸膏进行初步分离纯化的基础上，本实验进一步采用反复硅胶柱色谱、MCI凝胶柱色谱、ODS C18反相硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱等现代色谱分离技术，对肝苏颗粒浸膏石油醚部位和正丁醇B-3、B-4的化学成分进行了分离纯化，综合运用物理、化学方法及各种现代波谱分析技术（包括紫外、红外光谱、质谱、1H-NMR、13C-NMR、DEPT、2D-NMR）对所分得的32个化合物进行结构鉴定，分别为：酚酸类化合物12个：PC-05没食子酸(gallic acid)，PC-06没食子酸甲酯（methyl gallate），PC-07鞣花酸（ellagic acid），PC-08短叶苏木酚酸乙酯（ethyl brevifolincarboxylate），PC-09短叶苏木酚酸(brevifolin-carboxylic acid)，PC-10短叶苏木酚酸甲酯(methyl brevifolincarboxylate)， PC-119,9’-O-Diferuloyl-(-)-secoisolariciresinol, PC-122,6-dihydroxyacetophenone-4-O-β-D-glucoside， PC-13乔松素-7-O-[4",6"-(S)-六羟基联苯二甲酰基]-β-D-葡萄糖苷(pinocembrin-7-O-[4",6"-(S)-hexahydroxydiphenoyl]-β-D-glucose）， PC-14乔松素-7-O-[3’’-O-没食子酰基-4",6"-(S)-六羟基联苯二甲酰基]-β-D-葡萄糖苷pinocembrin-7-O-[3’’-O-galloyl-4",6"-(S)-hexahydroxydiphenoyl]-β-D-glucose，PC-15thonningianin A，PC-16thonningianin B;黄酮及其苷类16个：PC-17芹菜素（apigenin），PC-18山奈酚（kaempferol）， PC-19乔松素-7-O-β-D-葡萄糖苷(pinocembrin-7-O-β-D-glucopyranoside)，PC-20槲皮苷（quercitrin），PC-21槲皮素-3-O--L-阿拉伯糖苷（quercetin-3-O--L-arabinoside），PC-22山奈酚-3-O--L-鼠李糖苷（kaempferol-3-O--L-rhamnopyranoside），PC-232’,4’,6’-三羟基二氢查耳酮-4’-β-D-葡萄糖(2’,4’,6’-trihydroydihydrochalcone-4’-β-D-glucoside)，PC-242’,6’-二羟基二氢查耳酮-4’-O-(3’’-O-没食子酰基)-β-D-葡萄糖(2’,6’-dihydroydihydrochalcone-4’-O-[3"-O-galloyl]-β-D-glucoside)， PC-25槲皮素(qercetin)，PC-26山姜素-7-O-β-D-葡萄糖(alpinetin-7-O-β-D-glucopyranoside)，PC-27柚皮素（naringenin），PC-28白杨素(chrysin)，PC-29异槲皮苷（isoqueritrin），PC-30高车前素-7-(6-E-香豆酰基-β-D-葡萄糖)(hispidulin-7-(6-E-p-coumaroyl-β-D-gluco-pyranoside))，PC-31芦丁（rutin），PC-32芹菜素-7-O-β-D-呋喃芹菜糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖甙(apigenin-7-O-β-D-apiofuranosyl (1→2)-β-D-glucopyranoside)；4个其他类型的化合物：PC-01β-谷甾醇（β-sitosterol），PC-02β-胡萝卜苷（β-daucosterol），PC-03棕榈酸单甘油酯（glyoeryl nonopalmitate），PC-04十八碳二烯酸（linoleic acid）。二、肝苏颗粒抗肝纤维化活性研究本课题以TGF-β1诱导活化的大鼠肝星状细胞HSC-T6为模型对肝苏颗粒浸膏、各萃取部位及分得的部分单体化合物，进行了体外活性实验，研究发现正丁醇部位、乙酸乙酯部位和酚酸类化合物具有良好的抗肝纤维化活性，提示酚酸类化合物可能是肝苏颗粒发挥药效的重要的物质基础。三、肝苏颗粒指纹图谱和含量测定研究本文首先对肝苏颗粒的原料赶黄草的标准进行了研究。收集不同来源的23批次赶黄草样品，采用HPLC-DAD方法，建立了赶黄草药材的指纹图谱。运用HPLC-DAD-MS技术，结合化合物标准品比对，指认出12个共有峰，分别是没食子酸(1号峰)；短叶苏木酚酸(4号峰)；2,6-二羟基苯乙酮-4-O-β-D-葡萄糖苷(5号峰)；(-)-表儿茶素-3-O-没食子酸酯(6号峰)；山奈酚-3-O--L-呋喃阿拉伯糖苷（7号峰）；槲皮苷（8号峰）；槲皮素(11号峰)；乔松素-7-O-β-D-葡萄糖苷(12号峰)；pinocembrin-7-O-[4",6"-(S)-hexahydroxydiphenoyl]-β-D-glucose（13号峰）；thonningianA（14号峰）; thonningian B （15号峰）; PGHG（17号峰）。结合前期化学和活性的研究结果，建立了赶黄草药材多成分含量测定方法，对活性较强且含量较高的1，4，5，8，11，12，13，15，17峰进行了含量测定，并考察了不同产地、不同采收期、不同部位的赶黄草药材的含量，结果发现不同采收期，不同采收地的含量有所差异，这也为赶黄草药材最佳采收期及采收地的选择提供了一定的依据。本课题进一步完善了肝苏颗粒制剂的指纹图谱，并指认出11个共有峰，分别是没食子酸(1号峰)；短叶苏木酚酸(2号峰)；2,6-二羟基苯乙酮-4-O-β-D-葡萄糖苷(3号峰)；槲皮苷（5号峰）；槲皮素(6号峰)；乔松素-7-O-β-D-葡萄糖苷(7号峰)；2’,4’,6’-trihydroydihydrochalcone-4’-O-β-D-glucoside(8号峰)pinocembrin-7-O-[4",6"-(S)-hexahydroxydiphenoyl]-β-D-glucose （9号峰）；2’,6’-dihydroydihydrochalcone-4’-O-[3"-O-galloyl]-β-D-glucoside（10号峰）；thonningianA（12号峰）; PGHG（13号峰）。建立了肝苏颗粒中的1，2，3，5，7，8，10，12，13峰进行了含量测定含量的方法，为肝苏颗粒制剂标准制定提供了一定的依据。