【摘 要】
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近年来,淡水养殖池溏水体亚硝酸盐问题突出。在池塘养殖环境中,亚硝酸盐的氧化去除主要依赖亚硝酸盐氧化菌（Nitrite Oxidizing Bacteria,NOB）,但是,目前国内外关于池塘NOB研究报道较少。为探究养殖池塘NOB生态作用特征,本文分别用高通量测序和荧光定量PCR（Real-time PCR）技术调查了三口草鱼池塘环境NOB生物多样性和丰度。用富集分离方法,获得一种池塘硝化螺旋菌（
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近年来,淡水养殖池溏水体亚硝酸盐问题突出。在池塘养殖环境中,亚硝酸盐的氧化去除主要依赖亚硝酸盐氧化菌（Nitrite Oxidizing Bacteria,NOB）,但是,目前国内外关于池塘NOB研究报道较少。为探究养殖池塘NOB生态作用特征,本文分别用高通量测序和荧光定量PCR（Real-time PCR）技术调查了三口草鱼池塘环境NOB生物多样性和丰度。用富集分离方法,获得一种池塘硝化螺旋菌（Nitrospira）培养物,并探究了五种理化因子对其硝化活性的影响。得到以下重要结论:Real-time PCR结果表明,草鱼池塘水体中NOB亚硝酸盐氧化还原酶基因nxr A丰度范围为10~5～10~6copies/m L,呈现出显著性季节变化规律,秋季（10月）丰度最高,并且与池塘水体亚硝酸盐浓度呈显著性正相关关系（双变量相关性分析,P＜0.05）。在池塘表层沉积物中,NOB nxr A基因丰度变化范围为10~5～10~6copies/g,无明显变化规律,可能是反硝化菌群、厌氧氨氧化菌群都与其竞争底物亚硝酸盐所导致。通过对池塘环境微生物菌群16S r RNA基因分析,发现池塘沉积物中的化能自养型NOB主要为Nitrospira属类群,在水体中未发现已知化能自养型NOB类群,表明养殖池塘水体与沉积物NOB类群截然不同,水体NOB生物多样性有待进一步调查。淡水池塘NOB（Nitrospira）培养物适宜生长温度范围为25～37℃;低于10℃时,硝化活性完全丧失;10～25℃范围内,随着温度升高,NOB生物活性逐渐升高;40℃时,NOB仍具有硝化活性,但显著低于37℃条件下硝化活性。低溶氧（DO,1.0±0.5 mg/L）浓度条件下,池塘NOB硝化活性会被完全抑制;4.5±0.5 mg/L和6.8±0.5 mg/L DO条件下,NOB硝化活性没有显著区别。0.76～5.72‰盐度对淡水池塘NOB培养物硝化活性没有显著影响,5.72～29.84‰盐度范围内,随着盐度增加,NOB硝化活性显著降低,NOB硝化活性降低主要受制于离子浓度,而不受海水离子种类影响。6.0±0.1～8.0±0.1范围内p H对NOB培养物硝化活性没有显著影响。不同波长光照对NOB硝化活性有重要影响。随着波长减小,光照对池塘Nitrospria抑制程度增强。
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