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长期高脂饮食引起的能量过度摄入可导致机体脂质代谢异常,是高血脂症,高血糖,肥胖等疾病的首要危害因素。近年来,开发和利用功能性茶食品改善相关问题受到广泛关注,也是茶与健康领域研究的热点。六安瓜片绿茶是中国十大名茶之一,深受消费者喜爱,并且具有改善脂质代谢紊乱的作用。但是,如何进一步提高六安瓜片绿茶的功能作用有待于进一步深入思考。近年来,花草茶的健康功能逐步被科学界和大众关注,其开发规模和市场正逐步扩大。蝶豆花花瓣富含花青素等活性成分并且对脂肪细胞形成具有显著的抑制作用,说明蝶豆花花瓣具有开发花茶的潜力和应用价值,但其理论基础研究不够深入,目前还没有在动物模型上证明其对脂代谢紊乱的干预效果以及机制研究。因此,本研究以新型花草茶开发为实际应用出发点,评估六安瓜片绿茶和蝶豆花花瓣水提物在降脂活性上的异同,并分析其作用机制,为以蝶豆花为鲜花资源,开发新型花草茶提供理论基础。具体研究内容及结果如下:(1)本研究第一部分分别利用蝶豆花花瓣与六安瓜片绿茶为原料以1:200(m/v)的比例制备了六安瓜片绿茶水提物(LGT)及蝶豆花水提物(CT)。随后对两种水提物的主要活性成分、体外抗氧化活性及脂代谢功能酶的体外抑制能力进行了分析。结果表明LGT总酚含量及总黄酮含量相对较高,而CT总花青素含量相对较高;其次,LGT和CT均显示出较强的体外抗氧化性,包括DPPH自由基清除能力和铁离子还原能力;此外,LGT和CT对α-淀粉酶和血管紧张素转换酶均具有较强的抑制能力;而LGT对α-葡萄糖苷酶的抑制能力优于CT。(2)本研究第二部分利用3T3-L1前脂肪脂肪细胞为模型对LGT及CT的脂肪代谢调节作用进行评价。不同浓度的LGT或CT(250~1000μg/m L)孵育培养9天后对细胞活力、细胞内脂质含量、甘油三酯含量以及脂解程度进行了分析。结果表明,在250~1000μg/m L的浓度下,LGT和CT处理对细胞活力无显著影响;油红O染色结果显示500~1000μg/m L浓度的LGT及CT可显著降低3T3-L1前体脂肪细胞内脂质的含量,同时,500~1000μg/m L浓度的CT和750~1000μg/m L浓度的LGT可显著降低3T3-L1前体脂肪细胞内甘油三酯含量;进一步研究发现相同剂量下的CT相对于LGT,更为显著的增强了细胞的脂解作用。本部分研究结果表明,在所使用的剂量下LGT和CT对3T3-L1前体脂肪细胞均具有脂肪代谢调节作用,并且CT的调节作用优于相同剂量的LGT。(3)本研究第三部分利用C57BL/6J肥胖小鼠为模型对LGT及CT的体内降脂活性进行评价。以45%高脂高果糖饲料作为饲料干预16周诱导小鼠肥胖,小鼠被分为8个试验组:正常饮食组(LFFD)、高脂高果糖饮食组(HFFD)、高脂高果糖饲料+2.5 mg/m L绿茶水提物组(LGTL)、高脂高果糖饲料+5 mg/m L绿茶水提物组(LGTM)、高脂高果糖饲料+20 mg/m L绿茶水提物组(LGTH)、高脂高果糖饲料+2.5 mg/m L蝶豆花水提物组(CTL)、高脂高果糖饲料+2.5 mg/m L蝶豆花水提物组(CTM)和高脂高果糖饲料+20 mg/m L(蝶豆花水提物组(CTH)。结果表明,与HFFD相比,LGTH及CTH显著降低肥胖小鼠的体重、血脂含量和炎症反应,但CTH降低肥胖肝脏、腹部脂肪重量、肝损伤、氧化应激及血浆胰岛素水平和胰岛素抵抗指数的效果优于LGTH;此外,组织学分析发现LGT及CT均能抑制肝脏和脂肪组织中的脂质积累及改善脂肪肝的病理进展。本部分研究结果说明LGT及CT在高脂高果糖饲料诱导的C57BL/6J肥胖小鼠模型上具有降脂活性,同时综合实验结果说明CT的降脂活性效果优于相同剂量的LGT。(4)本研究第四部分对LGT及CT的降脂活性机制进行探究。首先,利用高量葡萄糖刺激的RAW 264.7巨噬细胞为模型,研究发现葡萄糖刺激细胞中PPARγ、LXRα、ABCA1和ABCG1的转录水平显著抑制,而同时孵育CT(500μg/m L)可钝化上述基因的抑制效果,但相同剂量的LGT无此作用;而利用PPARγ抑制剂T0070907可显著降低CT对上述基因的诱导作用;随后发现500μg/m L CT对LXRα、ABCA1和ABCG1转录水平的诱导作用因联合孵育LXRα激动剂T0901317进一步增强;同时利用细胞胆固醇流出试验发现500μg/m L CT可显著诱导细胞胆固醇的流出,但相同剂量的LGT无此作用;而利用si RNA将PPARγ沉默后,CT的促进细胞胆固醇流出作用显著减弱。随后对动物肝脏中PPARγ-LXRα-ABC途径相关蛋白进行印记和实时定量分析发现,高脂处理显著抑制动物肝脏中PPARγ和LXRα的蛋白表达水平,而CTH具有诱导肥胖小鼠肝脏PPARγ和LXRα蛋白表达的作用,并且效果优于等剂量的LGTH,进一步对肝脏中PPARγ途径下游基因的转录水平分析结果与细胞模型中的试验结果相一致。综上,本研究在体内外系统比较了LGT和CT降脂活性的异同,发现CT的降脂活性优于等量的LGT,并且证实CT主要是通过介导PPARγ-LXRα-ABC途径发挥其在体内外降脂活性功能,而LGT可能不依赖于该途径,相关研究结果为以蝶豆花为鲜花资源,开发新型花草茶提供理论基础。