【摘 要】
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研究目的:本研究以SH-SY5Y细胞为实验对象,使用棕榈酸(Palmitic acid,PA)模拟高脂模型,通过洛利普兰(Rolipram,Rol)预处理SH-SY5Y细胞,探讨Rol对PA导致的神经元细胞损伤的保护作用及其机制。研究方法:1.采用MTT监测不同浓度Rol(0.2,2,20,100,200μM)对SHSY5Y细胞的作用,选取最佳的Rol浓度。2.采用MTT监测不同浓度PA(25,5
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研究目的:本研究以SH-SY5Y细胞为实验对象,使用棕榈酸(Palmitic acid,PA)模拟高脂模型,通过洛利普兰(Rolipram,Rol)预处理SH-SY5Y细胞,探讨Rol对PA导致的神经元细胞损伤的保护作用及其机制。研究方法:1.采用MTT监测不同浓度Rol(0.2,2,20,100,200μM)对SHSY5Y细胞的作用,选取最佳的Rol浓度。2.采用MTT监测不同浓度PA(25,50,75,100,150,200,300μM)对SH-SY5Y细胞存活率的影响,选取造模最佳浓度。3.根据前面的实验结果分组如下:Control组、PA组(150μΜ)、Rol+PA组(Rol 10μΜ+PA150μΜ)、Rol组(10μΜ);采用MTT检测Rol是否对PA作用下SH-SY5Y细胞有保护作用。4.采用DHE(ROS)染色和检测氧化应激作用。5.用Western Blot检测凋亡蛋白Cleaved-Caspase-3、Bcl-2/Bax以及信号通路相关蛋白p-MAPK、p-AKT的表达。结果:1.PA作用下SH-SY5Y细胞存活率逐级递减。2.Rol可通过增加PA作用下SH-SY5Y细胞的存活率,对SH-SY5Y细胞起到保护作用。3.Rol可抑制PA作用下SH-SY5Y细胞中ROS的产生,并且调控凋亡蛋白Cleaved-caspase-3、Bcl-2/Bax,提示Rol保护作用与抑制氧化应激和凋亡相关。4.Rol可增加PA作用下SH-SY5Y细胞p-MAPK蛋白水平,提示Rol的保护作用可能与MAPK通路相关。
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