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目的：探讨Nesfatin-1在糖尿病(DM)大鼠胰腺中的表达及AMPK/mTORC1/SAD-A信号通路在DM发病中的意义，评估健脾消渴方对胰腺Nesfatin-1干预疗效及对AMPK/mTORC1/SAD-A信号通路的调节，阐明健脾消渴方发挥作用的可能机制，寻找治疗DM的新靶点。方法：46只健康SPF级雄性Wistar大鼠随机选取10只作为正常对照组，余36只高糖高脂饲料6周后，注射小剂量链脲佐菌素(30mg/kg)建立DM模型。将成模大鼠随机分为模型组(12只)，双胍组(12只)，中药组(12只)，正常对照组和模型组给予蒸馏水，双胍组给予二甲双胍混悬液，中药组给予健脾消渴方(浓缩为1g/ml)。6周后大鼠称重，检测空腹血糖(FBG)，糖化血红蛋白(HbA1c)，血脂(TG,TC,LDL-c,HDL-c)，空腹胰岛素(Fins)，血清胰高血糖素(GC)及nesfatin-1，计算HOMA-IR及胰岛素分泌指数；HE染色观察胰腺病理改变，免疫荧光分析胰岛β/α细胞和胰岛β/Nesaftin-1在胰腺中的分布和定位。RT-PCR观察Nesfatin-1、AMPKα、mTORC1、SAD-A mRNA在胰腺中的表达；Western Blot观察Nesfatin-1、AMPKα、SAD-A在胰腺的蛋白含量。结果：1.造模后大鼠FBG、HbA1c较正常组明显升高(P<0.01)，TG、LDL-c升高(P<0.05)，血清Fins降低(P<0.05)、HOMA-IR升高(P<0.05)，胰岛素分泌指数水平明显降低(P<0.01)，nesfatin-1和GC水平均明显升高(P<0.05)；HE染色及免疫荧光显示胰岛细胞明显萎缩，β细胞数量减少，胰岛α细胞和nesfatin-1数量增多，在胰岛中心有较多分布，证明T2DM模型诱导成功。RT-PCR和western blot显示nesfatin-1mRNA表达和蛋白量增强(P<0.05)，AMPKαmRNA表达增强(P<0.05)；mTORC1mRNA表达减弱(P<0.05)；SAD-A mRNA表达增强(P<0.05)。提示高血糖增强nesfatin-1、AMPKα及SAD-A的活性，抑制mTORC1的活性。2.与模型组比较，双胍组治疗后，FBG、HbA1c和体重下降明显(P<0.05)，Fins、HOMA-β及GC无明显改善(P>0.05)，HOMA-IR and nesfatin-1水平下降(P<0.05)。HE染色及免疫荧光显示胰岛中度萎缩，β细胞数量稍增多，胰岛α细胞和nesfatin-1数量减少，在胰岛中心散在表达。AMPKα和SAD-A mRNA和蛋白质表达明显增强(P<0.01,P<0.05)，mTORC1mRNA表达无明显改善(P>0.05)。3.与模型组比较，中药组治疗后， FBG和体重下降明显(P<0.05)；显著降低TG水平(P<0.01)，升高HDL-c(P<0.05)；Fins和HOMA-β均明显升高(P<0.05)，HOMA-IR明显下降(P<0.05)；血清nesfatin-1和GC水平显著降低(P<0.05)。HE染色及免疫荧光显示胰岛轻度萎缩，β细胞数量明显增多，胰岛α细胞和nesfatin-1数量较模型组明显减少，在胰岛中心散在表达。AMPKαmRNA表达减弱(P<0.05)，mTORC1mRNA表达增强(P<0.05)，SAD-A mRNA和蛋白质显著增强(P<0.01)。4.中药组与双胍组比较，双胍组降糖疗效优于中药组(P<0.05)，中药组降低体重优于二甲双胍(P<0.05)。中药组能显著降低TG(P<0.01)，升高HDL-c水平(P<0.05)。双胍组降低HOMA-IR和nesfatin-1水平优于中药组(P<0.05)。中药能升高Fins、HOMA-β水平及降低GC水平。HE染色及免疫荧光显示中药组修复胰岛细胞疗效优于双胍组。双胍组增强AMPKαmRNA表达的疗效优于中药组(P<0.05)，中药组增强mTORC1mRNA及SAD-A mRNA和蛋白质表达的疗效优于双胍组(P<0.05)。结论：1.糖尿病模型大鼠，存在血脂紊乱及IR，血清nesfatin-1及在胰腺的表达增强，AMPKα活性增强，mTORC1活性减弱，SAD-A活性稍有增强，提示nesfatin-1活性增强及AMPK/mTORC1/SAD-A信号通路异常可能是DM发病的主要致病机制之一。2.健脾消渴方可降低大鼠FBG，显著降低体重，降低TG、升高HDL-c水平，改善IR。3.健脾消渴方可降低血清nesfatin-1和GC的水平，抑制nesfatin-1和GC在胰腺的表达，调节胰岛α、β细胞及nesfatin-1在胰腺分布和数量，修复胰岛β细胞的形态改变。4.健脾消渴方可能通过抑制AMPKα活性，激活mTORC1及SAD-A在胰腺的表达保护胰岛β细胞。调整AMPK/mTORC1/SAD-A信号通路的相关因子的活性变化可能是健脾消渴方发挥作用的主要机制之一。