精子发生是一个受信号严格调控的连续分化发育的复杂过程。研究表明,在精子发生的每个阶段都有大量的长链非编码RNAs表达,其中许多lncRNAs可以通过与特定蛋白或RNA结合,在精子发生过程中充当重要的调节因子。目前已经发现几个lncRNAs在哺乳动物精子发生过程中,特别是在减数分裂阶段发挥着至关重要的作用。减数分裂精母细胞中的lncRNAs数量巨大,寻找出调控减数分裂关键的lncRNAs,并进行相应的功能分析和机制探究,不仅可以全面认识减数分裂过程中lncRNAs的作用,还可以为不育症的治疗提供新的思路,具有重要现实意义。为了探究长链非编码RNA在减数分裂中的作用,我们分离纯化了减数分裂相关的各期生精细胞并进行RNA测序。数据分析发现了一个睾丸特异的长链非编码RNA Rbakdn。其在精原细胞中低表达,在前细线期、细线期/偶线期和粗线期精母细胞中表达量逐渐升高。这些结果表明Rbakdn是一个减数分裂过程特异表达的长链非编码RNA。敲降Rbakdn促进了 GC-2spd细胞的凋亡。在精母细胞减数分裂体外诱导体系中敲降Rbakdn之后,生殖细胞增殖和分化形成colony的能力受到抑制,体外诱导的减数分裂进程也被抑制。小鼠睾丸内注射慢病毒介导的Rbakdn-shRNA敲降Rbakdn导致睾丸体积减小、精母细胞凋亡增加并且生精小管出现空泡化。进一步的机制探究发现:Rbakdn可以与Ptbp2结合,敲降Rbakdn导致精母细胞内Ptbp2的蛋白表达量下降,从而影响了为减数分裂准备的相关RNA的剪接,损害减数分裂所需的各种RNA的成熟,最终导致了精母细胞的凋亡。我们的研究表明长链非编码RNA Rbakdn可能在小鼠的减数分裂过程中发挥着重要的作用。本研究丰富了长链非编码RNA在小鼠减数分裂过程中的作用,可以为不育症的治疗提供新的潜在靶点和思路。精子鞭毛多发形态异常（MMAF）是一种严重的畸形精子症。MMAF表型的患者不育,精子鞭毛展示出多种形态异常:鞭毛缺失、短、卷曲、弯曲和/或直径不规则等。已经有研究表明DNAH1,AKAP4,CCDC39和AK7等基因突变可以导致MMAF,这些基因突变大约可以解释30%到50%的MMAF病例,但是还需要对MMAF的遗传性致病原因进行更多的探索。SPEF2是一种精子鞭毛发育相关蛋白,在小鼠和猪等动物中Spef2基因突变会严重损害精子活力,并导致精子短尾等表型。但是目前还没有关于人类SPEF2基因突变引起不育症的报道或相关研究。本文以42例精子鞭毛多发形态异常的不育症患者为研究对象,探讨了人类MMAF表型的新的遗传基因。通过对42例MMAF患者进行全外显子组测序,筛选出2例患者SPEF2基因中存在c.12delC、c.1745-2A>G、c.4102G>T和c.4323dupA突变。这些突变都很罕见且致病。透射电镜分析显示患者精子轴丝结构紊乱,线粒体鞘缺损。WB和IF分析显示,患者精子中SPEF2蛋白表达水平异常。我们的实验结果表明,SPEF2基因功能缺失突变可能是导致人MMAF表型的重要原因。这些发现促进了人们对MMAF致病原因和分子机制更全面的认识。