银杏叶综合利用工艺研究开发

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银杏叶(Ginkgo biloba L.)是银杏树的叶片,银杏叶中含有黄酮类约1%,萜内酯类约0.5%、莽草酸为3.5%、绿原酸为0.5%,多糖为5.0%。目前2015版中国药典收录的银杏叶提取物,是从银杏叶中提取黄酮、内酯类成分的提取物,其在食品及药品中开发利用较多,而对银杏叶中其他成分活性研发较少,比如莽草酸、绿原酸等一些成分。其中莽草酸是达菲药物的重要原料,市场需求量很大;绿原酸具有抗氧化、降低血脂、降低血糖等功能,在食品上作为一些果汁的护色剂以及水果保鲜作用。多糖具有延缓衰老以及抗炎症、肿瘤等功能。但在银杏叶提取物生产过程含有莽草酸、多糖、绿原酸活性成分废液被弃掉,因此从其制备出高含量的莽草酸、多糖、绿原酸产品,是为了更大程度的综合利用银杏叶资源,发挥其最大的经济价值。本论文主要进行了以下几个方面的工作:一、银杏叶原料确定:完成了5种不同树龄、不同产地、不同月份以及不同干燥方式的银杏叶中黄酮、内酯、莽草酸,多糖,绿原酸的含量检测,筛选出最佳银杏叶原料:树龄2~6年、产地为贵州、采摘月份9月、80℃烘干银杏叶。二、银杏叶中5种活性成分综合利用提取工艺:将银杏叶采用醇提方法,通过对莽草酸、绿原酸、黄酮、内酯、多糖分别进行正交试验,对数据进行综合分析处理,确定提取参数为:最优提取工艺为提取时间2h,提取温度为50℃,料液比为1:15,乙醇浓度为70%。三、银杏叶综合利用工艺研究:3.1、莽草酸纯化工艺:将银杏叶提取物生产过程产生的废水作为原料液,通过对几种树脂进行静态及动态试验进行筛选,确定大孔型阴离子树脂对莽草酸成分的富集效果最好,确定柱层析参数为:上样流速为1BV·h-1,纯净水除杂水洗到中性,采用4BV 4%甲酸进行洗脱,甲酸洗脱流速为2 BV·h-1。收集甲酸洗脱液真空浓缩后结晶,得粗结晶纯度为89.89%,再采用纯水进行重结晶,重结晶后莽草酸纯度可达到98%以上。3.2、绿原酸纯化工艺:将银杏叶提取物低酸去杂废液浓缩去醇后,水溶液作为原料液,上聚酰胺柱,用大量水进行洗脱,收集绿原酸水洗液,浓缩、分相萃取,将分相后水层液真空浓缩后避光静置结晶,即析出绿原酸白色针状晶体,抽滤后晶体避光干燥,含量为95.9%,粗晶体重结晶后得白色绿原酸晶体,含量达到98%以上。3.3、多糖纯化工艺:将银杏叶提取物生产过程中产生废水通过超滤后得到的液体作为多糖纯化的原料,用真空浓缩到小体积,加入95%的乙醇进行沉淀24h,用sevage试剂去蛋白、透析等过程,银杏多糖纯化后纯度达到60%以上。四、银杏叶综合利用工艺中试调试:银杏叶中银杏叶提取物、莽草酸、多糖、绿原酸的综合利用工艺中试调试3批验证结果表明,每批银杏叶投料量为800kg,产出24kg银杏叶提取物、16kg莽草酸、9.7kg银杏叶多糖,1.9kg绿原酸,三批次中试产品重复性好,产品质量稳定,银杏提取物黄酮以及内酯的含量符合药典标准要求,莽草酸含量为98.36%,绿原酸纯度为98.39%,多糖含量为61.20%。实现了银杏叶的综合利用,产品综合成本低,具有很大的市场竞争力。
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