【摘 要】
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目的:对三仁颗粒的提取和成型工艺进行优化,测定颗粒相对临界湿度;建立三仁颗粒的质量标准及指纹图谱,并筛选质量差异标志物;基于网络药理学构建大鼠湿热胃炎模型,研究三仁颗粒对湿热胃炎大鼠的药效作用,为三仁颗粒的进一步开发研究提供理论依据。方法:（1）通过查阅文献,对三仁汤进行处方考证;遵循古籍记载,结合现代实际操作,以出膏量、苦杏仁苷含量、50%乙醇浸出物含量为评价指标,通过古法标准煎液与正交试验对比
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目的:对三仁颗粒的提取和成型工艺进行优化,测定颗粒相对临界湿度;建立三仁颗粒的质量标准及指纹图谱,并筛选质量差异标志物;基于网络药理学构建大鼠湿热胃炎模型,研究三仁颗粒对湿热胃炎大鼠的药效作用,为三仁颗粒的进一步开发研究提供理论依据。方法:（1）通过查阅文献,对三仁汤进行处方考证;遵循古籍记载,结合现代实际操作,以出膏量、苦杏仁苷含量、50%乙醇浸出物含量为评价指标,通过古法标准煎液与正交试验对比优选三仁汤最佳提取工艺;以成型率、休止角、堆密度和吸湿率为评价指标,以熵权法分配权重,采用星点设计-响应面法优化三仁颗粒成型工艺;（2）通过确定颗粒剂一般项检查、薄层鉴别和含量测定方法,建立三仁颗粒的质量标准;（3）采用高效液相色谱法（HPLC）建立十批三仁颗粒的指纹图谱;运用聚类分析、正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）及变量重要性投影（VIP）值筛选三仁颗粒的质量差异标志物;（4）运用TCMSP筛选三仁颗粒的化学成分,使用Genebank搜索功能,针对湿热胃炎病症,获取其相关靶点信息,取交集于药物以及疾病相关靶标基因,使用STRING数据库对筛选出的主要作用靶点构建PPI网络,通过Cytoscape软件构建相应网络图,借助DAVID数据库对三仁颗粒治疗湿热胃炎相关靶基因进行GO富集分析及KEGG富集分析;建立大鼠湿热胃炎模型,比较不同给药组给药前后大鼠体质量、体温和粪便含水率差异,并采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中IL-1β（白细胞介素-1β）、IL-6（白细胞介素-6）、TNF-α（肿瘤坏死因子-α）、HSP-60（人热休克蛋白-60）、HSP-70（人热休克蛋白-70）含量变化。结果:（1）三仁汤最佳提取工艺为:以9.5倍量的加水量,浸泡一小时,煎煮一小时,再以8倍量的加水量,煎煮一小时;三仁颗粒最佳成型工艺为:糊精为辅料,药辅比1:1.5,乙醇体积分数78%,乙醇用量为药粉和辅料总量的0.21倍,三仁颗粒相对临界湿度为74.45%;（2）建立了三仁颗粒一般考察指标和苦杏仁、薏苡仁、厚朴的薄层鉴别方法,建立了苦杏仁苷的含量测定方法;（3）10批样品的指纹图谱共指认15个共有峰,相似度均大于0.90;聚类分析可将10批样品可分为四类,S1、S9为一类,S7为一类、S2、S8为一类,S3～S6、S10为一类;OPLS-DA和VIP值结果显示,8号峰、9号峰（苦杏仁苷）和10号峰VIP值均大于1;（4）通过构建成分-靶点网络找出三仁颗粒中的相关活性成分,通过匹配药物靶点以及疾病靶点,找出治疗湿热胃炎的44个靶点,并且经过蛋白互作网络找到相关性最高的五个靶点TP53、IL-6、JUN、IL-1β、VEGFA。通过GO及KEGG富集分析可以得出,三仁汤是通过多蛋白、多信号通路来抑制炎症反应、调节激素的分泌,产生治疗湿热胃炎等作用;湿热胃炎模型大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量较对照组均极显著升高（P＜0.01）,经三仁颗粒中、高剂量治疗后均极显著降低（P＜0.01）;与对照组相比,模型组大鼠血清中HSP-60和HSP-70含量均极显著上升（P＜0.01）,给药治疗后,与模型组相比,各给药组HSP-60和HSP-70含量极显著降低（P?0.01）。结论:该提取方法有效成分提取率高,稳定可靠;成型工艺方法成型率高,流动性好,且工艺简单;质量标准和指纹图谱各检查项方法均稳定可靠,能够为三仁颗粒的质量标准提供理论依据;8号峰、9号峰（苦杏仁苷）和10号峰可能是影响三仁颗粒质量的差异标志物。基于网络药理学建立大鼠湿热胃炎模型,明确了三仁颗粒不同剂量治疗湿热胃炎大鼠的药效作用差异,为三仁颗粒的药效物质基础研究和临床应用提供理论依据。
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