【摘 要】
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霍乱是世界七大流行病之一，为我国甲类法定传染病，它是由霍乱弧菌引起的一种烈性肠道传染病，具有发病急、传播快、波及面广的特点，危害极其严重。自1817年以来，已发生过7次世界大
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霍乱是世界七大流行病之一，为我国甲类法定传染病，它是由霍乱弧菌引起的一种烈性肠道传染病，具有发病急、传播快、波及面广的特点，危害极其严重。自1817年以来，已发生过7次世界大流行。霍乱肠毒素(Cholera enterotoxin，CT)是引起霍乱的主要致病因子，由一个A亚单位(CTA)和5个相同的B亚单位(CTB)组成。它是一种很强的免疫原和粘膜免疫佐剂，可用于研制粘膜疫苗。由于CT佐剂活性的作用机制一直没被真正阐明，在某种程度上妨碍了对它的应用。目前，对CT亚单位蛋白CTB及其编码基因ctxB作为粘膜佐剂的研究较多，对其亚单位蛋白CTA和CT全毒素作为佐剂的研究较少，将ctxA基因、ctxB基因和ctxA、ctxB的融合基因ctxAB作为佐剂分子，同时比较三者在动物体内的佐剂活性研究还尚未见报道。本研究选择霍乱弧菌肠毒素(ctx)基因为研究对象，首次利用重叠PCR将ctxA基因和ctxB基因融合为ctxAB融合基因，同时构建了ctxA、ctxB和ctxAB三种分子佐剂DAN疫苗，为探讨ctxAB融合基因与ctxA基因、ctxB基因的佐剂活性及其作为佐剂分子的应用价值奠定了基础。 首先，从GenBank上获取霍乱弧菌569B的肠毒素基因序列，利用
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