双歧杆菌胞外分子的分离纯化及鉴定

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双歧杆菌(Bifidobacterial.adolescentis)培养液离心后取上清液,经乙醇沉淀,柱层析,超滤浓缩得到四种糖蛋白(BIFPG-1,BIFPG-2,BIFPG-3,BIFPG-4).它们的平均分子量分别为36kDa,138kDa,182kDa,204kDa.其中BIFPG-3、BIFPG-4经SDS-PAGE和Sephadex G-150柱层析证明是单一均匀的糖蛋白.BIFPG-3的糖含量为84.7%、蛋白含量为15.3%,用气相色谱、薄层层析、红外光谱分析表明含有D-半乳糖、D-甘露糖、D-葡萄糖,其摩尔比为1:0.48:0.26.推测含β-型糖苷键.BIFPG-3对Sephadex G-150有催化水解作用,被认为是一种葡聚糖水解酶.该酶最适宜pH值为4.2,在pH4.5~7.2范围内稳定,最适温为45℃.BIFPG-4含有四个分子量相同的亚基(每个亚基分子量为51kDa);糖含量为71.9%、蛋白含量为28.1%.用气相色谱、薄层层析、红外光谱分析表明含有鼠李糖、D-葡萄糖、D-半乳糖,其摩尔比为1:0.16:0.04.BIFPG-4经毛细管电泳鉴定,与棉籽糖有特异结合.
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