本试验通过摸索增加细胞通透性的方法,使外源酶容易进入细胞内与底物作用,确定出一条周期短、效率高的制备完整肽聚糖的方法,这对实现完整肽聚糖工业化生产具有促进作用。试验内容及结果如下:摸索物理渗透法、冻融法、珠磨法、溶菌酶法、去除磷壁酸等增加细胞通透性的方法,确定三氯乙酸可以有效去除细胞壁磷壁酸,增加细胞通透性,通过优化最终确定完整肽聚糖的提取路线为:10% TCA在70℃搅拌1hr,然后用乙酸钠、氯仿、甲醇混合液脱脂24hr,用酶活力为3500U的胰酶和碱性蛋白酶共同处理12hr,最后通过离心清洗去除杂质。改良后制备完整肽聚糖的方法不仅缩短了提取时间,而且其获得完整肽聚糖的得率是Sekine法的5.86倍。按改良法制备婴儿双歧杆菌完整肽聚糖样品,其氨基酸组成成分分析、氨基己糖含量(20.04 mg/g)、总糖含量(528.89 mg/g)、总脂含量(37.16 mg/g)、蛋白含量(329.47 mg/g)、磷含量(0.21 mg/g)及透射电镜观察的形态与Sekine法制备的完整肽聚糖一致,说明改良法提取的完整肽聚糖品质没有弱化。通过MTT法检测婴儿双歧杆菌完整肽聚糖抑制肿瘤的效果,以抑制率大于30%为敏感的标准,婴儿双歧杆菌全菌、完整肽聚糖、完整肽聚糖超声破碎样对乳腺癌细胞均不敏感;500ug的完整肽聚糖(抑制率为51.21%,作用最强)、100ug的完整肽聚糖(抑制率为34.77%)对胃癌细胞均敏感,说明肽聚糖结构的完整性可以提高其抑制肿瘤的效果。