GOLPH3在卵巢癌组织中的表达及作用机制的初步研究

来源 :泰山医学院 | 被引量 : 2次 | 上传用户:zhy510167943
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背景卵巢癌(ovarian carcinoma,OC)是女性生殖系统常见的恶性肿瘤,早期不易发现,一旦发现常常已属晚期。上皮性卵巢癌(Epithelial Ovarian Cancer, EOC)是卵巢癌中最常见的一种类型,是妇科肿瘤中死亡率最高的一种类型。目前卵巢癌的常规治疗仍然是手术、化疗、放疗和内分泌治疗等措施,但这些治疗方法都存在着疗效不佳的问题。随着分子生物学的发展,肿瘤分子的靶向治疗成为众多学者关注的热点,基因干扰技术正逐步用于目的基因及相关基因的作用机制的研究。高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)是近年来发现的一种癌基因,在多种实体肿瘤中存在过表达,并与肿瘤的临床分期、肿瘤病理分级及转移侵袭密切相关。GOLPH3在多种生物学过程中发挥作用,参与多种恶性肿瘤的发展过程,其高表达多与不良的临床预后有关,而GOLPH3在卵巢癌的发生、发展中的作用机制目前还不清楚。目的本课题旨在研究GOLPH3在卵巢浆液性囊腺癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系,并利用基因干扰技术初步探讨GOLPH3在卵巢癌细胞生物学行为方面的的作用机制,阐明GOLPH3在卵巢癌发生、发展过程中的作用。方法1.应用实时荧光定量PCR、蛋白印记法(Western blot)分别检测各组织标本中GOLPH3在mRNA和蛋白水平的表达,并与患者临床病理特征进行相关性分析。2.构建针对人GOLPH3基因的shRNA表达质粒(GOLPH3-shRNA),转染人卵巢癌SW626细胞系,使GOLPH3基因沉默。3.利用CCK-8、细胞克隆形成实验及Transwell小室法检测GOLPH3-shRNA转染后对SW626细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果1.GOLPH3mRNA在卵巢浆液性囊腺癌组织中的表达高于卵巢囊腺瘤组(2.33-7.34倍),差异具有统计学意义(P<0.05)。GOLPH3蛋白在卵巢浆液性囊腺癌组织中阳性表达率(73.8%)明显高于卵巢囊腺瘤组(35.71%)(P<0.01),差异具有统计学意义。2.GOLPH3蛋白阳性表达与浆液性囊腺癌的临床分期(p=0.019)、病理分级(p=0.042)及有无淋巴结转移(p=0.000)有关,而与患者的年龄(p=0.881)无关(P>0.05);并且肿瘤细胞的分化程度越低其GOLPH3蛋白表达量越高(P<0.01),差异具有统计学意义。3.细胞实验中干扰质粒转染48小时后SW626细胞的转染效率约为75%,干扰组的GOLPH3的mRNA及蛋白表达水平的表达均明显下调(P <0.01),差异具有统计学意义。4.干扰组肿瘤细胞的增殖能力受抑制(P <0.01),且这种抑制作用与时间无关;卵巢癌肿瘤细胞的克隆形成能力降低(P <0.01);卵巢癌肿瘤细胞的转移及侵袭能力亦明显降低(P <0.01),差异具有统计学意义。结论1.GOLPH3在卵巢浆液性囊腺癌的发生、发展中发挥着重要的作用。2.GOLPG3促进卵巢癌的增殖、生长、迁移及侵袭,有可能成为卵巢癌治疗新的靶基因。
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