特种稻种子内生菌的分离鉴定及其功能研究

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水稻内生菌是指生存在水稻体内却不会对水稻产生明显危害的微生物,包括真菌、细菌、放线菌等。水稻内生菌能产生纤维素酶等酶类物质,还能改善水稻品质,提高水稻产量,增加水稻的固氮能力,提高水稻抗性等。不同地区、不同品种的水稻以及水稻不同部位的内生菌都存在多样性。本研究从四种特种稻种子中分离得到内生真菌和细菌,并对从黑米分离的部分菌株进行了 ITS或16srDNA分析;从内生真菌中筛选出产纤维素酶活力最强的真菌,并优化了其产酶条件;研究了8种内生菌对黑米抗氧化能力的影响,为利用内生菌改善黑米品质的研究奠定了基础。主要结果如下:1.特种稻种子内生真菌的分离鉴定:从四种特种稻种子中分离得到共50个内生真菌菌株,对其中的19个菌株进行ITS分析,结果表明这19个菌株属于Gibberella、Dothideomycete、Alternaria、Cochliobolus、Arthrinium、Phaeosphaeria、Colletotrichum、Fusarium、Phoma 等9个属。2.特种稻种子内生细菌的分离鉴定:从四种特种稻种子中分离得到共35个内生细菌菌株,对其中9个菌株进行16srDNA分析,结果表明这9个菌株属于Pantoea、Microbacterium、Xanthomonas、Curtobacterium 等 4个属。3.产纤维素酶内生真菌的筛选及其产酶条件的优化:从48种内生真菌中筛选出产纤维素酶活力最高的菌株PT9-3,其最佳产酶条件为:秸秆添加量1.88%,装液量48ml,pH 5.89,温度28℃,接种量5片/瓶,氮源0.5%硫酸铵,转速150rpm,培养5天,酶活力为5.57U/ml,比优化前提高23.3%。4.特种稻种子内生菌对黑米抗氧化能力的影响:选取黑米的8种内生菌,喷施抽穗期的两个黑米品种。结果表明:8个菌株都能显著提高黑米“1C902”的总抗氧化能力,其中最高可提高6.3倍,提高量为832.838U/g;有6个菌株能显著提高黑米“1C902”的抑制羟自由基能力,其中最高可提高130%,提高量为1855.348U/g;有3个菌株能显著提高黑米“1C903”的总抗氧化能力,其中最高可提高110%,提高量为946.455单位/g;有4个菌株能显著提高黑米“1C903”的抑制羟自由基能力,其中最高可提高82.14%,提高量为848.19U/g。
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