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肾上腺素受体（AR）作为神经免疫调节的关键受体，可能参与了类风湿关节炎（RA）的发生、发展过程。树突细胞（DCs）作为功能强大的抗原提呈细胞，在调节免疫应答反应中起重要作用，可能在以下几个方面参与RA的发病机制：DCs能激活淋巴器官中MHC限制性自身免疫反应，诱导免疫应答；DCs浸润至滑膜和滑液中，关节局部内摄取、处理、提呈抗原，促使RA迁延持续；DCs、滑膜细胞、巨噬细胞一起产生炎性介质，进一步刺激产生RA的炎症免疫反应等。成纤维样滑膜细胞（FLS）是类风湿关节炎的主要效应细胞，其异常增殖，同时自身分泌的IL-1β、TNF-α和RANKL等炎性细胞因子加剧了局部的炎症反应。DCs和FLS均有AR的表达，均可能参与对RA的神经免疫调节，尤其是β-AR信号可能具有炎症免疫调节的作用。本课题采用佐剂性关节炎（AA）大鼠模型，运用流式细胞术、QRT-PCR、免疫荧光、免疫印迹等方法，通过观察β-AR激动药（ISO）对DCs和FLS功能的影响，探讨β-AR及其信号对DCs和FLS功能的调节作用，进一步研究该信号通路在AA大鼠DCs和FLS中的异常变化及部分机制，为揭示β-AR信号转导参与RA异常炎症免疫反应的病理机制提供实验依据。目的：观察β-AR信号对大鼠DCs和FLS功能的调节作用，探讨AA大鼠DCs和FLS上β-AR信号的变化及对其功能的影响，为揭示β-AR信号转导参与RA异常炎症免疫反应的病理机制以及药物作用新靶点提供重要依据。方法：采用rIL-4、rGM-CSF刺激大鼠骨髓源细胞，诱导生成DCs；流式细胞术检测DCs表型CD80、CD86、MHC-Ⅱ的表达和抗原摄取功能，FLS表面β2-AR的表达采用FITC标记的二抗间标法检测，均以平均荧光强度表示表达的高低；MTT法检测FLS的增殖及混合淋巴细胞反应（MLR）中T细胞的增殖；ELISA法检测IL-1β、IL-10、TNF-α、RANKL、OPG和cAMP的水平；采用完全弗氏佐剂于大鼠足趾注射制得AA模型，β2-AR激动药灌胃给予，使用足爪仪测足爪容积计算足爪肿胀度，HE染色观察关节病理，胸腺、脾脏重量与体重的比值表示胸腺、脾脏指数；免疫组化法检测β2-AR在DCs和FLS上的分布；免疫荧光法检测β2-AR在FLS上的表达情况；Western blot法检测β2-AR、GRK2、β-arrestin2的膜表达和p-ERK的表达；QRT-PCR法检测β2-AR mRNA、GRK2mRNA的表达。结果：1. β-AR信号对AA大鼠DCs功能的影响β-AR激动药ISO能明显下调CD86、MHC-Ⅱ的表达，对CD80表达无明显影响；ISO能明显提高DCs的抗原摄取功能，升高IL-10的水平，抑制MLR。ISO主要通过β1-AR信号下调CD86的表达，通过β2-AR信号影响MHC-Ⅱ的表达、影响抗原的摄取功能、产生对MLR的影响。β2-AR激动药沙丁胺醇体内给药能显著下调AA大鼠肠系膜淋巴结DCs和骨髓源DCs表面MHC-II的表达，提高DCs的吞噬能力，但对CD80、CD86的表达无明显影响，与体外实验结果一致；β2-AR激动药沙丁胺醇能明显降低AA大鼠足爪肿胀度，不同程度的改善关节的异常病理；能显著降低AA大鼠的胸腺、脾脏指数，抑制T淋巴细胞，但对B淋巴细胞增殖反应无明显影响。ISO处理后的AA模型组骨髓源DCs对T细胞增殖的抑制作用明显低于正常组，Western blot法检测AA模型组大鼠骨髓源DCs胞膜中β2-AR表达明显下降。AA病程中研究发现，致炎后d21、d28，β2-AR的膜表达显著降低，GRK2的膜表达显著升高；基因水平显示，β2-AR mRNA、GRK2mRNA无显著变化。2. β-AR信号对AA大鼠FLS功能的影响ISO能明显抑制FLS的增殖，抑制FLS分泌IL-1β、TNF-α和RANKL的水平，促进OPG的分泌水平，其抑制增殖作用主要通过β2-AR信号发挥。β2-AR激动药沙丁胺醇体内给药能抑制FLS的增殖反应。β2-AR在AA大鼠FLS胞膜的表达显著下降，ISO对其增殖的抑制作用明显降低，刺激后β2-AR的脱敏作用明显高于正常对照组。AA大鼠FLS胞膜中GRK2、β-arrestin2的表达显著升高。AA模型组cAMP水平明显降低，经ISO刺激后对照组和AA模型组cAMP水平均显著升高，但AA模型组cAMP水平显著低于对照组。AA模型组p-ERK水平显著增高，经ISO刺激，AA模型组p-ERK水平显著高于对照组；与未刺激组相比，ISO能显著升高AA模型组FLS p-ERK的水平，对对照组无明显影响。结论：1. β2-AR信号参与了对DCs和FLS功能的调节。（1）β2-AR信号促进DCs的抗原摄取，抑制其抗原的提呈功能。（2）β2-AR信号的激活可以抑制FLS增殖。2. β2-AR信号在AA大鼠DCs和FLS中的异常改变是其对激动药反应存在差异的原因。（1）AA大鼠DCs和FLS中β2-AR膜表达下降是其对激动药反应减弱的重要原因。（2）AA大鼠GRK2、β-arrestin2转膜的增加，导致β2-AR脱敏的增强，可能是β2-AR膜表达下降主要原因。（3） β-arrestin2转膜的增加，导致p-ERK表达的增高，也可能是AA大鼠FLS对β-AR激动药反应减弱的原因。