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目的:探讨通过RNAi技术靶向沉默ADM基因对人胰腺癌细胞系MiaPaCa-2侵袭和迁移能力的影响及其作用机制,并可能为胰腺癌的临床治疗提供新的思路。方法:①培养人胰腺癌细胞系MiaPaCa-2,采用PCR定性检测细胞中ADM mRNA的表达,Western Blot法检测细胞中ADM蛋白表达情况。②设计并合成含双shRNA沉默靶点的质粒PgenesilADM及阴性对照组质粒PgenesilHK,鉴定和提纯以上质粒。③实验随机分为空白对照组、空质粒PgenesilKB组、阴性质粒PgenesilHK组及实验组PgenesilADM组,除空白对照组外,其余各组分别用脂质体转染PgenesilKB PgenesilHK、PgenesilADM至MiaPaCa-2胰腺癌细胞,转染48h后,采用Transwell侵袭、迁移实验检测各组中MiaPaCa-2胰腺癌细胞侵袭和迁移能力的变化。④转染48h后,采用实时荧光定量PCR技术法检测各组细胞中ADM mRNA的表达变化;采用Western Blot检测各组细胞中ADM蛋白表达情况变化。结果:①通过PCR及Western Blot法验证MiaPaCa-2胰腺癌细胞系中有ADM mRNA及ADM蛋白表达。②PgenesilADM组转染细胞后,胰腺癌细胞的侵袭和迁移能力明显低于空白对照组、PgenesilKB组及PgenesilHK组(P<0.05),空白对照组、PgenesilKB组、PgenesilHK组三组之间无统计学差异(P>0.05)。③荧光定量PCR中,PgenesilADM组在MiaPaCa-2胰腺癌细胞中的ADM mRNA的表达水平低于空白对照组、PgenesilKB组和PgenesilHK组(P<0.05),空白对照组、PgenesilKB组、PgenesilHK组之间无统计学差异(P>0.05)。④Western Blot实验中,PgenesilADM组在MiaPaCa-2胰腺癌细胞中的ADM蛋白的表达水平低于空白对照组、PgenesilKB组及PgenesilHK组(P<0.05),空白对照组、PgenesilKB组及PgenesilHK组之间无统计学差异(P>0.05)。结论:1.对于胰腺癌细胞系MiaPaCa-2, ADM在mRNA和蛋白水平均有表达。2.使用重组质粒PgenesilADM转染MiaPaCa-2胰腺癌细胞可减弱MiaPaCa-2胰腺癌细胞侵袭和迁移能力,其具体机制不清。3.利用RNAi技术靶向沉默ADM mRNA可造成MiaPaCa-2胰腺癌细胞中ADM的mRNA及蛋白表达水平降低。说明通过沉默ADM基因可以降低ADM的表达,ADM表达降低可能是MiaPaCa-2胰腺癌细胞的侵袭和迁移能力减弱的原因,而具体分子生物学机制尚待进一步研究。