目的:膀胱癌（Bladder Cancer,BLCA）是全球第十大的恶性肿瘤,在泌尿系统肿瘤中其发病率高居第二位。在BLCA的初期诊断时,大约70%的患者被诊断为非肌层浸润性膀胱癌（Non-Muscle Invasive Bladder Cancer,NMIBC）,而其余30%左右患者则诊断为肌层浸润性膀胱癌（Muscle Invasive Bladder Cancer,MIBC）。虽然BLCA的多种联合应用治疗可显著提高患者的预后,但转移性的BLCA通常无法治愈,其患者的5年总生存率仅为15%。因此,迫切需要寻找导致BLCA恶性转移的关键因素,这对于更好地诊治BLCA尤为关键。上皮间质转化（Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT）是细胞从上皮转换为间质形态的谱系转化过程,表现为上皮标志物的减少以及间充质标志物的增加,通过这种转换过程,细胞获得了移行能力及侵袭潜能。目前已充分证实,EMT与肿瘤细胞的侵袭及迁移密切相关。在膀胱癌中的一项分析表明,EMT是导致NMIBC到MIBC转换的关键生物学过程。TEAD4作为TEAD家族的成员之一,在肿瘤中多呈高表达并与患者的不良预后相关。本研究应用TCGA数据库分析发现EMT是引起BLCA不良预后的关键生物学过程,且TEAD4与BLCA的EMT过程密切相关。同时,KEGG分析提示在该过程中PI3K/AKT通路起到重要的调控作用。因此,我们在前期生信分析的基础上,进一步研究TEAD4在BLCA侵袭转移过程中潜在的生物学功能及作用机制,研究方法:1.应用TCGA及GTEx数据库筛选BLCA肿瘤与癌旁间的差异表达基因（Differential expressed genes,DEGs）,通过KM及Uni Cox筛选具有预后价值的DEGs;应用Multi-Cox筛选具有独立预后价值的临床病理特征并构建BLCA的预后风险模型,GSEA预测导致BLCA不良预后的分子机制。2.应用TCGA数据库及组织芯片的BLCA样本分析TEAD4在肿瘤与癌旁间的表达差异,以及其在不同病理分期分级样本中的表达情况。3.应用CCK8及克隆形成实验检测敲低及过表达TEAD4对BLCA细胞增殖能力的影响;通过划痕修复实验及Transwell实验检测敲低及过表达TEAD4对BLCA细胞侵袭迁移能力的影响。4.应用Western Blot测定TEAD4敲低及过表达对BLCA细胞EMT及侵袭相关标志物的影响。5.通过提取TEAD4相关差异基因进行KEGG富集分析,明确起主要作用的关键通路,Western Blot验证通路相关蛋白的表达情况;在膀胱癌细胞中加入PI3K/AKT通路抑制剂后,划痕修复实验及Transwell检测其对细胞侵袭转移的影响,Western Blot检测对EMT标志物的影响。6.在过表达TEAD4的细胞中加入PI3K/AKT抑制剂LY294002,在敲低TEAD4的细胞中加入PI3K/AKT激活剂740Y-P,划痕修复实验及Transwell检测其对细胞侵袭转移的影响,Western Blot检测EMT标志物的变化。7.通过构建裸鼠肺转移模型检测敲低TEAD4对BLCA侵袭能力的影响。结果:1.EMT是导致BLCA患者预后不良的关键因素;FASN、IGFL2、PLOD1和TEAD4可作为BLCA的独立预后因子,其中TEAD4与EMT的相关性最强。2.TEAD4在BLCA组织中呈高表达并与分期分级呈正相关。3.TEAD4不调控BLCA细胞的增殖,但可显著促进BLCA细胞的侵袭转移及EMT。4.KEGG富集分析结果提示PI3K/AKT通路显著富集,TEAD4可调控PI3K/AKT通路活性;PI3K/AKT通路可调控BLCA细胞的EMT及侵袭转移。5.回复实验结果表明,PI3K/AKT通路在TEAD4对EMT的调控过程中起到关键作用。6.TEAD4可在体内水平促进BLCA细胞的转移。结论:1.EMT是导致BLCA患者预后不良的关键生物学因素。2.TEAD4可作为独立预后因子并通过PI3K/AKT通路促进BLCA的EMT。