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[目的]:检测云南宣威地区非小细胞肺癌术后患者中EML4-ALK融合基因的表达情况,探讨不同浓度Tae684(ALK抑制剂)对XWLC-05、BEAS-2B细胞生长的影响。[方法]:1.选取2011年3月到2012年4月昆明医科大学第三附属医院胸外科的术后确诊肺癌的癌组织54例。其中宣威地区27例,非宣威地区27例,对收集的标本采用免疫组化的方法对标本进行ALK相关蛋白检测。2.对检测阳性的肺癌患者进行临床特点的总结,对各地的表达的情况进行比较。3.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同时间和不同浓度Tae684和CDDP对XWLC-05细胞、BEAS-2B细胞生长的抑制作用,并将每种细胞分为四组即阴性对照组、溶剂对照组、实验组(加入Tae684)和阳性对照组(加入CDDP),确定半数抑制浓度(IC50);4.用流式细胞仪来检测XWLC-05和BEAS-2B在Tae684和CDDP分别作用24h和48h后,来检测细胞的周期以及细胞的凋亡情况。5. XWLC-05细胞经tae-684及CDDP诱导72h,固定液处理,免疫荧光纤维镜下,观察细胞凋亡情况;6.数据统计和分析采用SPSS17.0软件包进行。数据以均数±标准差(x±s)表示,组间资料应用单因素方差分析(ONE WAY ANOVA)和t检验。[结果]:1.27例宣威地区非小细胞肺癌中有4例阳性,27例云南其他地区非小细胞肺癌中有2例表达为阳性。所检测的病例中宣威地区中表达率为14.8%;非宣威地区为7.4%。两个地区进行组间比较p=0.669>0.05,差异没有统计学意义。2.对云南的54例肺癌的术后患者的标本进行ALK的免疫组化检测,有6例阳性,表达率为11.1%。其中强阳性4例阳,阳性有2例。腺癌5例、大细胞癌1例。ALK(+)中的患者中,通过组间比较在咯血、淋巴结转移p值<0.05,差异具有统计学意义。3.Tae-684及CDDP对XWLC-05细胞BEAS-2B细胞的体外抑制作用随着时间和浓度增大,抑制率逐渐增大,XWLC-05细胞在Tae684为6.47±0.78μg/ml和CDDP4.78±1.80μg/ml,BEAS-2B细胞在Tae684为4.46±1.16μg/ml和CDDP2.13±0.20μg/ml。在抑制率方面,四组通过组间比较,p=0.023<0.05,差异具有统计学意义。4.3nM的tae684对BEAS-2B细胞24h时出现的周期阻滞,G2期细胞逐渐增多,48h G2期细胞达到73.6%;凋亡检测也逐渐增多,48h BEAS-2B细胞的凋亡率为14.5%。3nM的tae684对XWLC-05细胞在24h时出现明显的周期阻滞,G2期细胞逐渐增多,48h G2期细胞达到84.3%;凋亡检测也逐渐增多,48hXWLC-05细胞的凋亡率为26.3%。两组之间通过组间比较,p值<0.05,差异具有统计学意义。5.Tae-684诱导XWLC-05细胞BEAS-2B细胞72h后经PI染色处理,荧光显微镜观察,以诱导细胞以产生凋亡小体为主,最后导致细胞凋亡。[结论]:1.在云南宣威地区的非小细胞肺癌中ALK相关蛋白的表达率与云南其他地区相似。从表达率来说,宣威地区较云南地区稍高;2.云南地区非小细胞肺癌中ALK(+)的患者,一般有咯血,切较早出现淋巴结转移;3.Tae684对XWLC-05和BEAS-2B细胞在一定的范围内呈时间剂量依赖性;Tae684对XWLC-05细胞的抑制作用强于BEAS-2B细胞;4.Tae-684对XWLC-05和BEAS-2B细胞的作用,以诱导细胞以产生凋亡小体为主,最后导致细胞凋亡。