目的:软骨是由软骨细胞和间质细胞共同组成的组织。软骨中的基质处于凝胶状态,并且具有强大的韧性。在骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者中,关节及周围组织会逐渐出现退变,另外关节软骨与关节也会出现退化。当关节组织修复与组织破坏之间的平衡关系被破坏时,就会促使关节软骨出现脱落,软骨下骨逐渐重塑、骨赘形成、周围韧带松弛、关节周围肌肉减弱,以上不可以逆转的损伤持续性发展就会形成OA。二甲双胍可以发挥全身抗炎作用,降低炎症因子水平,增加抗炎因子水平,还可以减弱炎症因子介导的软骨分解,维持软骨内稳态,保护软骨。本研究旨在探讨二甲双胍是否能够在体外实验中促进软骨细胞中细胞外基质的分泌,以及二甲双胍是否具有延缓软骨细胞衰老过程的作用。方法:从新西兰白兔的膝关节上提取并消化分离出P0代兔软骨细胞,P0代细胞消化并传代得出P1代兔软骨细胞,将P1代兔软骨细胞培养成团块,同时在培养过程中加入不同浓度的二甲双胍(1,10,100,1000μmol/L),培养14天后将进行番红O-快绿染色和免疫组化染色,观察二甲双胍是否具有促进兔软骨细胞外基质的表达。然后进行CCK-8实验、RT-PCR实验,观察软骨细胞形态,同时检测不同浓度的二甲双胍是否对软骨细胞增殖能力有影响。最后将不同浓度梯度的H2O2诱导兔软骨细胞早衰,确定最适早衰浓度后,将不同浓度二甲双胍加入早衰细胞中,为了检测细胞早衰情况,我们采用β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色与DAPI试剂染色,同时计算阳性细胞数量(细胞染成蓝色),计算得出阳性衰老细胞的比率。以研究并观察二甲双胍对软骨细胞衰老进程是否有影响。结果:通过番红O-快绿染色与免疫组化染色,我们发现二甲双胍能一定程度的促进兔软骨细胞分泌细胞外基质,通过CCK-8实验可见二甲双胍在一定程度上能够促进兔软骨细胞增殖。通过H2O2诱导兔软骨细胞早衰实验,我们可以得出早衰兔软骨细胞的生物学活性可以通过加入不同浓度梯度的二甲双胍后表达出来,可见二甲双胍具有一定的延缓早衰软骨细胞衰老进程的能力。结论:二甲双胍可以能够延缓早衰软骨细胞的衰老过程,同时能够促进软骨细胞分泌二型胶原(Collagen type Ⅱ,COL Ⅱ)等软骨基质。