XPLN对人结肠肿瘤细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响

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目的:通过研究XPLN在人结肠肿瘤细胞中的表达及其对结肠肿瘤细胞的影响验证XPLN对人结肠肿瘤细胞生物学活性的作用。探讨XPLN在结肠肿瘤诊断及治疗中的新思路。方法:1.通过免疫组化检测结肠肿瘤组织及癌旁正常组织XPLN的表达情况,了解在结肠肿瘤细胞中XPLN的表达情况。2.通过慢病毒转染人结肠癌细胞系HT29构建稳定的XPLN过表达细胞系、阴性对照组及空白组。3.通过细胞实验观察XPLN异常沉默表达或高表达对结肠癌细胞株生长的影响同时验证XPLN对AKT、ERK不同靶点磷酸化的影响及其可能的靶基因。结果:我们证实了癌旁组织的XPLN的表达量高于癌症组织。我们通过构建的三组稳定的HT29细胞系进行体外生物实验表明结肠癌细胞中XPLN的高表达可抑制结肠癌细胞增殖及迁移能力并促进结肠癌细胞凋亡。对XPLN过表达HT29细胞系进一步行qPCR分析得出caspase3及VEGF可能为XPLN在结肠癌中的靶基因。并结合蛋白免疫印迹法验证得出XPLN能抑制AKT磷酸化,从而影响PI3K/AKT/mTOR信号通路,最终抑制结肠癌细胞的增殖并促进凋亡。结论:XPLN在结肠癌组织中呈低表达,在伴有转移的结肠癌组织中更加明显。XPLN可以明显抑制结肠癌的发生发展,且与结肠癌患者预后密切相关,其可能调控的基因为caspase3及VEGF,并能抑制AKT的磷酸化,从而抑制肿瘤组织中相关通路活性。XPLN有望作为结肠肿瘤临床诊疗的新靶点。
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