脱落酸生产工艺优化及其生物合成途径初步研究

来源 :中国药科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:laoqiangshou
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该论文首先通过紫外、激光诱变、紫外激光复合诱变及两种抑制剂平板对产脱落酸菌种Boytris Cinerea进行选育与筛选.获得的最高产量的高产菌比出发菌的产酸量提高了98.2﹪.将四株最高产量的菌株进行五代传代稳定性实验,表明高产菌的遗传稳定性较好.随后进行的抑制剂平板筛选实验表明两种抑制剂对菌的抑制作用范围基本相同.抑制剂平板筛选结合紫外诱变使菌株的产酸能力也有不同的提高.该文还针对真菌中可能存在,但尚未见报道的经类胡萝卜素降解,间接生物合成脱落酸的途径进行了研究.实验结果表明,添加类胡萝卜素、维生素A等物质,可大幅度提高真菌发酵脱落酸的产量.从而表明胡萝卜素、维生素A等可能为真菌生物合成脱落酸的前体,提示真菌可能与高等植物中脱落酸生物合成类似,存在间接合成途径.实验中还通过正交实验考察了前体物质的最佳添加浓度,经优化的脱落酸液体发酵产量是对照的2.38倍.另外,该论文对脱落酸的分离纯化技术进行了研究和优化.通过对比几种不同溶剂对发酵菌的提取效果以及几种不同的大孔吸附树脂对脱落酸的吸附能力,得到了最佳提取条件,简化了以前的分离纯化步骤.实验选择了常用的HPD100(D101)大孔吸附树脂进行分离纯化工艺的研究,经过分段洗脱,主要洗脱段脱落酸的回收率为43.2﹪.经二步简单纯化就可以得到纯度在95.3﹪左右的粉末状样品.这大大简化了以前的费用昂贵不易回收再利用的分离纯化工艺,将大大降低脱落酸的工业成本.最后,该论文还对真菌生物转化合成脱落酸进行了初步研究.其结果为进一步证实真菌中脱落酸的生物合成存在经类胡萝卜素的间接途径提供了依据.该转化法可为脱落酸生产提供新的思路.
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