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一、临床研究目的:基于MR-DTI评价三步推拿法干预冻结肩（FS）的临床疗效,探究推拿干预FS关节囊纤维化的作用机理,为推拿治疗FS提供循证依据。方法:采用随机、对照方法,将纳入的57例FS患者随机分为治疗组（三步推拿法）n=29例与对照组（中频电疗法）n=28例;治疗每周3次,隔日1次,共治疗6周;治疗结束后,从VAS评分、Constant-Murley（CMS）肩关节功能评分、肩关节MRI、肩袖肌群弥散张量成像及相应的FA和ADC值、临床整体疗效、肩痛情况、患者依从性及安全性等方面进行数据统计分析。结果:（1）VAS评分及CMS评分:治疗后组内比较显示,与治疗前相比,两组VAS评分均显着降低（P＜0.01）,CMS评分显著增加（P＜0.01）;组间比较显示治疗第3周及第6周结束时,治疗组在降低VAS评分、增加CMS评分等方面疗效显著优于对照组（P＜0.01）,但在治疗后16周随访时两组之间评分比较差异无统计学意义（P＞0.05）;（2）MRI特征性表现:治疗第6周结束时,两组患者肩关节盂肱下韧带肿胀、腋囊外水肿、喙肱韧带水肿、肩袖间隙水肿、关节周围积液体积较治疗前均明显减轻（P＜0.01）;腋窝肱骨部分关节囊厚度、喙肱韧带厚度等下降差异显著（P＜0.05）;腋窝关节盂部分关节囊厚度、肩袖间隙关节囊厚度、囊袋高度及宽度治疗前后未见明显差异（P＞0.05）;与对照组相比,治疗组肩周水肿减轻程度及腋窝肱骨部分关节囊厚度降低更加明显（P＜0.05）。（3）肩袖肌群MR-DTI表现:经过6周的治疗后,治疗组肩袖肌肉（SSP、ISP、TM、SSC）FA值均较治疗前明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）,而ADC值仅在ISP、SSC中下降差异明显（P＜0.01）,在SSP、TM中差异无统计学意义（P＞0.05）;对照组治疗后肩袖肌肉的FA值仅在ISP、TM中较治疗前升高,差异有统计学意义（P＜0.01）,在SSP、SSC中差异不具有统计学意义（P＞0.05）;ADC值治疗前后仅在ISP中降低明显（P＜0.05）,而SSP、TM、SSC中差异无统计学意义（P＞0.05）;组间比较显示治疗组在改善肩袖肌群水分子弥散度方面较对照组疗效显著（P＜0.05）。（4）整体疗效方面:治疗组有效率为89.66%,对照组有效率为78.57%,且治疗组短期疗效较对照组疗效显著;治疗后治疗组肩部夜间痛、运动时疼痛及自发性疼痛的发生率也低于对照组。（5）依从性及安全性:在6周的治疗过程中,两组患者依从性良好,均未出现明显不良反应。结论:三步推拿法与中频电疗法治疗渐冻期FS均有确切的疗效,但三步推拿法在改善FS患者症状方面短期疗效优于中频电疗法;三步推拿法能快速缓解FS患者肩部疼痛和恢复患肩功能,减轻肩关节囊水肿和纤维化增厚,恢复肩周肌肉功能,缩短FS的自然病程。二、实验研究目的:本实验研究将观察推拿对肩关节囊组织病理形态、炎症及纤维化因子表达的影响,初步揭示推拿改善FS关节囊纤维化的效应机制,为今后推拿治疗FS相关机制研究提供实验基础及研究思路。方法:选用6月龄健康雄性清洁级新西兰兔32只;采用持续劳损加冰敷的方法制备冻结肩家兔模型,将成模家兔16只随机分为2组,分别为模型组、模型推拿组,每组各8只;另将正常家兔16只随机分为空白对照组及空白推拿组,每组各8只。空白对照组不做干预,模型组成模后不做干预,空白推拿组给予推拿干预、模型推拿组成模后行推拿干预。推拿干预1次/天,20min/次,共干预3周。干预结束后予腹腔麻醉,取血后处死,留取右肩关节囊及滑膜组织标本。采用HE染色法观察肩关节囊及滑膜病理组织形态,Elisa法检测血清及关节囊IL-1β、TNF-α、PGE2含量的表达,免疫组织化学法及Western blot法检测关节囊TGF-β1、PPAR-γ、MMP-1、MMP-9、TIMP-1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白表达水平。结果:（1）关节囊及滑膜组织病理。滑膜:干预3周,关节囊滑膜HE染色显示,与空白对照组及空白推拿组相比,模型组滑膜细胞大量增生并浸润到纤维层,细胞排列紊乱且结构致密,局部出现大量的炎症细胞增生和血管;与模型组兔关节囊相比,模型推拿组显示,滑膜细胞没有出现大量增殖和迁移的迹象,排列稍紧密,血管和炎症细胞浸润相对模型组较轻。关节囊:干预3周,纤维层HE染色显示,与空白对照组及空白推拿组相比,模型组肩关节囊纤维层正常的疏松网状结构被破坏,胶原蛋白堆积、纤维束排列方向紊乱,出现强嗜酸性的深染区域,形成了含有细胞团的纤维块样组织;与模型组兔关节囊相比,模型推拿组显示纤维层的网状结构保存相对于模型组较完整,胶原纤维束排列稍紊乱,但并未出现强嗜酸性的深染区域,没有纤维团块的形成。（2）动物实验Elisa结果显示:干预3周后,血清及关节囊Elisa检测结果显示,IL-1β、TNF-α及PGE2炎性因子表达在空白对照组和空白推拿组之间没有显著差异（P＞0.05）;与空白对照组相比较,模型组中IL-1β、TNF-α及PGE2的表达量明显增加（P＜0.01）;与模型组相比较,模型推拿组能够降低IL-1β、TNF-α及PGE2的表达,差异具有统计学意义（P＜0.01）。（3）动物实验免疫组化及WB结果显示:1)实验动物干预3周,与空白对照组相比,空白推拿组能升高肩关节囊组织中PPAR-γ的表达,而TGF-β1、MMP-1、MMP-9、TIMP-1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ等蛋白表达在两组肩关节囊组织中无统计学意义（P＞0.05）。2)与空白对照组相比,模型组肩关节囊组织中TGF-β1、PPAR-γ、MMP-1、MMP-9、TIMP-1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ表达水平均升高,差异有统计学意义（P＜0.01）;同时模型组中MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值降低。3)与模型组比较,模型推拿组能够降低关节囊组织中TGF-β1、TIMP-1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白表达水平,差异有统计学意义（P＜0.05）。4)与模型组比较,模型推拿组能够升高关节囊组织中PPAR-γ、MMP-1、MMP-9的表达水平,同时上调MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1的比值。结论:推拿干预可能通过抑制肩关节囊中IL-1β、TNF-α、PGE2等炎症因子的释放,下调TGF-β1的表达、上调MMPs/TIMPs比值和PPAR-γ蛋白表达,改善局部慢性炎性损伤,抑制成纤维细胞的增殖,促进肩关节囊中胶原蛋白的降解,减轻肩关节囊纤维化。