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目的:观察退变腰椎间盘髓核组织中P-p38MAPK的表达情况和Ⅱ型胶原含量的变化,探讨P-p38MAPK与腰椎间盘退变程度间的关系。内容:HE染色后在光镜下观察实验组和对照组的髓核组织病理差异;免疫组化法测定实验组和对照组的髓核组织中Ⅱ型胶原的含量;免疫组化法测定实验组和对照组中P-p38MAPK在髓核细胞中的表达情况。方法:选取40例临床病人术后腰椎间盘标本。分为2组。第1组(实验组):共25例。其中男性17例,女性8例,年龄32-65岁。来自腰椎间盘突出症患者。第2组(对照组):共15例,男性11例,女性4例,年龄6-36岁。其中12例来自腰椎骨折的年轻病人,2例来自腰椎结核邻近节段的椎间盘组织;1例来自儿童腰5半椎体畸形的病人,所有病人无腰疼病史、CT和MRI检查未见有腰椎间盘突出。所有标本分别制作蜡块和冰冻切片。HE染色后,在光镜下观察实验组和对照组的髓核组织病理差异。用免疫组化法测定P-p38MAPK的表达情况。阳性结果判断:P-p38MAPK蛋白表达于细胞核,呈黄色或棕黄色颗粒。免疫组化法测定Ⅱ型胶原纤维表达情况。Ⅱ型胶原纤维表达在细胞浆和细胞外基质中。Ⅱ型胶原免疫组化阳性结果判断:Ⅱ型胶原在基质和细胞浆中表达,呈现黄色或棕黄色。应用图像分析软件评价分析免疫组化染色的P-p38MAPK和Ⅱ型胶原在相应区域的表达情况,自动计算出其灰度值查看表达的强弱。灰度分级O--255级,0级最深,255级最浅,其值越小,表达就越强。测定结果为视野内的平均灰度。每个标本选取7个视野,取其平均值作为该标本的平均灰度值。对照组和实验组的数据用双自由样本t检验进行统计分析。最后分析每个标本中的P-p38MAPK和Ⅱ型胶原的相关性。结果:1HE染色普通目镜下观察:对照组:髓核组织切片中髓核细胞分布于细胞外基质中,数量较多,呈圆形或椭圆形,细胞周围胶原纤维排列有序形成网状结构。实验组:髓核组织切片中髓核细胞和软骨细胞数目较少,细胞较大且外形不规则,细胞质中出现“空泡征”。细胞外周胶原纤维排列混乱,有粘液性变。其间可见空洞或断裂的纤维结构。2免疫组化法测定P-p38MAPK结果如下:对照组中P-p38MAPK表达较少,平均灰度值为198.81±17.52;实验组中P-p38MAPK表达较多,平均灰度值为115.99±21.11;两者差异性明显(P<0.05)。3免疫组化法测定Ⅱ型胶原结果如下:对照组中Ⅱ型胶原表达较多,平均灰度值为163.52±11.27;实验组中Ⅱ型胶原表达较少,平均灰度值为187.98±17.25;两组间差异性明显(P<0.05)。4随着椎间盘退变,P-p38MAPK在髓核细胞中的表达逐渐增多,Ⅱ型胶原的含量逐渐减少。两则之间具有相关性。相关系数为r=-0.731。结论:1在退变的腰椎间盘组织中存在P-p38MAPK的大量表达。2随着腰椎间盘组织退病变程度的加重,P-p38MAPK的表达量也逐渐增加,P-p38MAPK可能参与了椎间盘的退变过程,是腰椎间盘退变的原因之一。