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纳米粒子作为一种药物载体,其应用前景备受关注,利用纳米粒子的可修饰性来改善药物的性能已成为纳米药物研究的主要目的,尤其是在抗癌药物领域。本课题主要设计了一种可利用可见光激发活化药物的纳米载药体系。通过引入高水溶性且毒性低的荧光碳量子点作为药物载体,使该载药体系可以在不加入其它荧光基团的条件下实现在生物体内实时跟踪监测;同时选择在生物体内稳定但可被光照还原活化的光活性叠氮铂配合物作为被负载的小分子药物,以实现药物的可控活化。同时纳米粒子表面修饰有导向基团叶酸,可实现药物对癌细胞的定向输送。 主要内容包括:以活性炭为初始碳源在酸性条件下氧化回流制备表面含大量羧基的荧光碳量子点,并以其作为载体通过酰胺键负载可光控释放的四价叠氮铂配合物:cis-Pt(N3)2(OH)2(NH3)(3-NH2-Py), trans-Pt(N3)2(OH)2(NH3)(3-NH2-Py)及 trans-Pt(N3)2(OH)2(NH3)(4-COOH-Py),碳量子点表面的剩余羧基位点以乙二胺(en)为桥连分子接上导向基团叶酸,至此得到铂配合物与碳量子点结合的三种纳米载药体系NS-1,NS-2及NS-3。 对三种四价铂配合物及其负载的NS-1,NS-2及NS-3纳米载药体系分别用不同强度的紫外及可见光作为光源检测其光照还原性能。实验结果表明三种四价铂配合物均可在光照下被还原,光照强度及光照时间对其还原速率和还原程度均有影响,还原后的铂配合物可与小牛胸腺DNA(CT-DNA)结合。而谷胱甘肽(GSH)在无光照条件下并不能使四价铂配合物还原为二价,表明该体系在无光照条件下具良好的稳定性,在生物体系中将不受还原性氨基酸如GSH的影响。 最后将所制备的纳米载药体系NS-1,NS-2进行细胞实验(NS-3由于光照还原性能较差被淘汰),检测其荧光示踪、细胞毒性、光活化性能等。MTT实验结果表明光活化培养24 h后,样品NS-1及NS-2对Hela细胞的毒性与顺铂相当,而无光照条件下对细胞作用不大,表明该体系在细胞内具很好的稳定性;激光共聚焦结果表明叶酸受体过度表达的Hela细胞对样品的摄取明显大于叶酸受体弱表达的MCF-7细胞,表明该纳米载药体系具良好导向性;而流式细胞结果表明该纳米载药体系经光照活化后主要促进Hela细胞的程序性凋亡(早期及晚期凋亡)。 该纳米载药体系是目前为止第一个将光活性叠氮铂配合物负载到荧光纳米粒子上的纳米载药体系,该体系具备荧光示踪、可见光控活化及定向输送等优越性能。