目的:近年来,结肠癌的发病率和死亡率随着人们生活水平的提高和饮食习惯的改变有逐年上升的趋势,严重影响人们的身体健康,缩短平均寿命。目前认为结肠癌发生机制主要为:1.腺瘤癌变;2.溃疡性结肠炎-大肠癌通路;3.幼年性息肉病-癌途径。其中腺瘤癌变通路占绝大部分。正常黏膜由于APC突变导致细胞增生,DNA甲基化异常促进腺瘤形成,再由于Ras突变及DCC丢失、P53突变形成腺癌。另外微卫星的不稳定性也是遗传性非息肉病性大肠癌的发病因素,无论何种原因,癌干细胞的形成无疑是癌发生的关键因素,上皮起源的癌干细胞可能经历上皮细胞到间充质的转变,导致间充质特征的癌干细胞产生,多种研究表明claudin是形成上皮-间充质-癌干细胞的关键因子。Claudin即闭锁蛋白是构成细胞间紧密连接的最重要的膜蛋白结构分子,紧密连接(tight junction TJ)是胃肠粘膜上皮细胞间最重要的细胞间连接,位于连接复合体上极,负责形成细胞间栅栏和屏障功能,紧密连接蛋白包括claudin、occludin、ZOs以及连接粘附分子(JAM)等,claudin结构及功能变化导致紧密连接的结构和功能改变,紧密连接渗透功能的改变导致更多的营养物质供肿瘤生长,而细胞与紧密连接的破坏使细胞间抑制减弱,相临细胞互相融合使癌细胞呈倍数增多,乃至沿淋巴和血液向远处传播。Claudin-3和claudin-4同起源于7号染色体长臂1区1带2亚带3次亚带,多项研究提示在结肠癌中claudin-3、-4均表达为升高,但有相反结论,在转移性结直肠癌中claudin-4下降。本实验旨在检测claudin-3和claudin-4在正常结直肠粘膜、不同病理类型的结直肠腺瘤和结直肠癌中的表达,探讨它们在预示结直肠腺瘤恶变中的作用。方法:①实验材料:收集2012年1月-2013年6月解放军252医院经普外科手术切除的结直肠癌60例及配对正常大肠粘膜组织40例(即癌旁正常组织,取自手术切除残端,距离癌组织5cm以上),60例大肠癌患者术前均未进行化疗、放疗及靶向治疗。解放军252医院消化内镜中心结直肠腺瘤切除后取材90例,包括管状腺瘤30例,混合型性腺瘤30例,绒毛状腺瘤30例。所有标本均经资深病理科医师审查及筛选。②检测指标:HE染色观察结直肠腺瘤、结直肠癌以及正常结直肠粘膜的显微镜下的形态学变化,区分结直肠腺瘤的病理类型和组织分化程度。采用免疫组织化学技术检测claudin-3、claudin-4在细胞中的定位及表达情况。③数据统计与分析:检测值采用SPSS17.0统计学软件中的χ2检验,P<0.05差异有统计学意义。结果:1 Claudin-3主要分布在正常组织靠肠腔面上皮细胞的细胞膜表达,腔内分泌物亦有表达,claudin-3在正常结直肠粘膜组、腺瘤组、结直肠癌组表达之间均有显著性差异,P<0.05,阳性表达率分别为12.5%,41.1%,73.3%;在管状腺瘤、管状绒毛状混合腺瘤和绒毛状腺瘤中表达逐渐升高,有明显统计学差异,P<0.05,阳性表达率分别为23.3%,43.33%,56.67%。2 Claudin4主要分布在正常组织靠肠腔面上皮细胞的细胞膜和胞质中,在腺瘤中细胞膜上分布更多,结直肠癌中亦以细胞膜表现为主;在腺瘤中表达最高,结直肠癌组织中表达下降,差异有统计学意义,P<0.05,阳性表达率分别为55%,67.8%,43.3%,在三种腺瘤中绒毛状腺瘤表达最高。管状腺瘤、管状绒毛状混合腺瘤、绒毛状腺瘤中阳性表达率分别为46.67%、70.0%、86.67%。结论:1 Claudin-3与结直肠腺瘤的恶变及结直肠癌的发生密切相关。绒毛状腺瘤恶变几率明显高于管状及混合腺瘤,与大肠癌的发生更密切相关。Claudin-3可以作为评估结直肠腺瘤的进展和结直肠癌发生的检测指标,有可能成为预测结直肠腺瘤恶变的分子生物学指标。2 Claudin-4在正常肠上皮中存在,在腺瘤中表达升高,在绒毛状腺瘤中最高,在结直肠癌中表达下降,其意义尚有待于进一步研究。