研究背景和研究目的:胆囊癌（GBC）在世界范围内仍是一种高致死性疾病。mi R-552家族可促进多种消化系统肿瘤的恶性进展,但尚未阐明mi R-552-3p在GBC中的作用。预测mi R-552-3p靶向肿瘤抑制基因“排斥性导向分子BMP共同受体A”（RGMA）的m RNA的3’非翻译区（3’UTR）。本研究的目的是阐明针对RGMA的mi R-552-3p在GBC恶性进展中的作用和机制。研究方法:（一）体外研究:通过实时定量PCR（q RT-PCR）检测mi R-552-3p在肿瘤和非肿瘤邻近组织（NATs）中的表达。使用慢病毒敲低GBC细胞系中的mi R-552-3p,通过q RT-PCR评估GBC干细胞相关的转录因子和分子标记。使用Cell Counting Kit-8（CCK-8）,成球实验和transwell实验来确定GBC细胞的相关恶性表型。mi R-552-3p靶向RGMA的3’UTR通过生物信息学预测、双荧光素酶实验以及基因表达量变化测定和功能回复实验在内的综合分析验证。（二）体内研究:建立皮下荷瘤模型和肺转移模型,分别观察敲减mi R-552-3p对肿瘤发生和器官转移情况的影响。实验结果:mi R-552-3p在GBC组织和肿瘤干细胞中异常高表达。对SGC-996和GBC-SD细胞中的mi R-552-3p的敲减抑制了GBC干细胞的扩增。相反,mi R-552-3p在体外和体内均可促进GBC细胞增殖,迁移和侵袭。因此,对该mi RNA的干扰阻碍了GBC的恶性进展。此外,重要的肿瘤抑制基因RGMA被确定为mi R-552-3p的靶点。RGMA功能的获得或丧失分别消除或增强了mi R-552-3p对细胞增殖和转移的影响。在机制上,mi R-552-3p通过重新激活Akt-β-catenin途径和上皮-间质转化（EMT）促进了GBC进程。在临床意义上,mi R-552-3p与GBC的多恶性特征相关,并作为GBC结局的预后指标。结论:mi R-552-3p通过抑制肿瘤抑制基因RGMA,重新激活Akt/β-catenin信号通路促进GBC的恶性进展。研究背景和研究目的:由于胆囊癌病例数少、恶性程度高、疾病进展快,其分子靶向治疗方法的研究受到一定的阻碍,因此亟需通过相关基础研究来建立可以模拟或替代治疗的动物模型,并探究对胆囊癌的多模式治疗方法。建立胆囊癌（GBC）人源性异种移植（patient-derived xenograft,PDX）模型,并比较PDX模型肿瘤与原代供体肿瘤的生物学一致性;利用该模型筛选胆囊癌相关突变基因,为胆囊癌的个体化治疗提供有效的临床前模型和新的治疗靶点。研究方法:1.取10例手术切除的胆囊癌新鲜肿瘤组织移植到裸鼠皮下,建立胆囊癌PDX模型;2.通过对其中两例PDX肿瘤组织进行苏木精-伊红（Hematoxylin-eosin,H-E）、Ki67免疫组化染色分析;3.对上述两例PDX肿瘤组织和配对的正常组织全外显子测序（whole exome sequencing,WES）检测体细胞突变;4.通过生物信息学等分析,最终筛选出可能与胆囊癌发生发展密切相关的基因。实验结果:1.本研究中胆囊癌PDX模型构建成功率为70%（7/10）;2.PDX肿瘤组织与供体肿瘤的病理组织结构和生长特征基本相似;3.经WES测序的2例建模患者中,PDX模型有害突变基因与原代供体肿瘤相同率为71.4%（15/21）和65.2%（15/23）,相同基因分别占模型有害突变的93.8%（15/16）和71.4%（15/21）。两例供体肿瘤共涉及TP53、ABCC4、AMPD1、EPHA6等32个突变基因,与模型共同的基因包括TP53、ABCC4、AMPD1等22个;4.通过生物信息学分析,最终筛选出可能与胆囊癌发生发展密切相关的TP53、ABCC4等10个基因。实验结论:本研究建立的胆囊癌PDX模型与供体组织病理学相似度较高,同时有害突变基因拷贝性较高,且模型中包含的供体有害突变占模型有害突变的总比例较高,该模型可以有效替代胆囊癌患者进行个体化治疗的临床前研究。此外,TP53、ABCC4等10个突变基因可能成为GBC新的潜在治疗靶点。