冷诱导下柠条锦鸡儿SSH文库的构建

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 14次 | 上传用户:ddeng
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低温是影响植物生长及分布的一个重要生态因子,限制一些对冷敏感的作物在低温季节的种植,导致光合效率低下、作物产量降低。柠条锦鸡儿分布于草原化荒漠和典型荒漠带的固定和半固定沙地上,在低温胁迫下具有很强的保水、吸水能力,适应低温环境。目前,人们对其的研究主要集中在生物学特性、光合特性和水分特性上,但对其分子机理的研究很少。以低温胁迫的柠条锦鸡儿cDNA为试验方(tester),以正常生长的柠条锦鸡儿cDNA为驱动方(driver),利用抑制性差减杂交技术构建了柠条锦鸡儿低温诱导表达差减文库,文库扩增后得到1318个阳性克隆,菌落PCR分析,得到250-750 bp插入片段。将整个文库克隆进行测序,测得序列结果利用BLAST与GenBank数据库进行同源序列比对分析,共获得238个Contigs和584个Singlets,合计822个UniESTs。柠条锦鸡儿体内富含多糖,作者改进了RNA的提取方法,使其适用于从柠条锦鸡儿的茎和叶中提取高质量的RNA。
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