小鼠卵巢冷冻保存及异体异位移植研究

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  本研究的目的是将1日龄雌鼠卵巢冷冻保存1周至6个月后,再异体异位移植到成年雌鼠的肾脏包膜下,以了解移植卵巢的原始卵泡能否在异体异位移植状况下重新启动生长发育,最后通过卵泡体外成熟探讨能否获得成熟的卵母细胞、体外成熟的卵母细胞能否进行体外受精以及受精后的胚胎能否完成体外的发育等。该研究对雌性动物卵巢生殖资源的冷冻保存、扩大卵母细胞的来源和卵母细胞的开发利用具有重要意义,将会大大推动生殖技术的发展,并能促进该技术在人类辅助生殖上的应用。   本实验主要分三部分进行:第一部分分离1日龄B6C2F1小鼠卵巢并用程序冷冻仪冷冻后置入液氮中保存,保存1周至6个月后解冻并将卵巢移植到8~12周龄B6C2F1受体鼠肾脏包膜下;第二部分对受体鼠进行激素处理以促进移植的卵巢内卵泡的发育;第三部分通过机械法分离移植卵巢卵母细胞并进行体外成熟。   通过上述研究可以得出如下结论:早期卵巢经过冷冻——解冻并经异体异位移植后,其原始卵泡能够重新启动生长。与正常雌鼠卵巢相同,移植卵巢的卵母细胞能够在体外成熟并能体外受精,且受精后形成的胚胎能够在体外发育至囊胚。该种模型在雌性动物生殖资源的冷冻保存、濒危动物保种、建立动物基因库、在人类辅助生殖方面扩大卵母细胞的来源和卵母细胞的开发利用、胚胎干细胞建系等方面具有极大的研究意义和应用前景。
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