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单细胞绿藻是植物分子生物学研究的良好材料,其电击转化因操作简单、成本低等特点倍受研究者的青睐。但传统的藻类电击转化方法中,必须使用较强电场和较长电击时间才能保证外源基因导入细胞内,这带来的负面效果就是增加细胞的致死率从而降低电击转化效率。本研究通过探索不同电击条件转化单细胞绿藻,优化了绿藻转化体系,旨在提高藻类的电击转化效率,为小球藻和莱茵衣藻的进一步利用奠定方法学基础。DR5是生长素诱导的生物活性很强且特异性很高的启动子,结合激光共聚焦显微镜观察,DR5::GFP能够直观且灵敏地反映细胞和组织水平的生长素活性强弱。本研究将DR5::GFP转入到单细胞小球藻中,并对其进行了荧光分析,旨在利用转DR5::GFP绿藻为探针细胞实现单细胞水平IAA测定提供良好的前期基础。主要试验结果如下：(1)建立了绿藻单细胞转化体系,得到了电击最优转化条件。确定了小球藻和莱茵衣藻转化子筛选的潮霉素浓度分别为25 mg/L和100 mg/L,以及小球藻转化子筛选的卡那霉素浓度为100 mg/L。获得了绿藻原生质体电击转化的最佳电场强度,小球藻和莱茵衣藻的原生质体最佳电击场强分别为0.8 KV/cm和0.6 KV/crn。获得了原生质体电击转化最佳脉冲时间,确定小球藻和莱茵衣藻的最佳脉冲时间均为10 ms。发现制备原生质体和2-DG处理能明显提高绿藻电击转化效率。(2)得到了转DR5：：GFP小球藻。通过制备原生质体和2-DG处理并在0.8KV/cm、脉冲时间为10 ms的电击条件下,得到了转DR5::GFP小球藻。(3)获得了适宜诱导GFP表达的IAA浓度。通过不同浓度IAA处理转DR5::GFP小球藻,经激光共聚焦显微镜观察GFP荧光,发现在IAA终浓度为4μg/mL、5μg/mL时其荧光明显。(4)得到了转DR5::GFP小球藻低温保存的较佳条件。通过对不同冷冻温度、不同冷冻保护剂处理的小球藻进行冷冻保存,解冻7天后,结果发现小球藻最优的保存温度为-70℃,冷冻保护剂为10%DMSO+10%蔗糖,其解冻存活率最高,达34.68%。