在骨骼肌损伤修复过程中按摩对自由基相关酶和成肌调节因子的影响研究

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目的通过研究按摩对损伤骨骼肌修复过程中自由基相关酶(如谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、髓过氧化物酶(MPO)活力值,细胞磷脂酶A2(PLA2)mRNA)和成肌调节因子(Myf5mRNA和MyoD mRNA)的表达的作用,以及血管内皮生长因子(VEGF, Vascular endothelialgrowth factor)的表达影响,探讨在损伤骨骼肌修复过程中按摩对骨骼肌形态和细胞功能的相关机制。方法健康成年新西兰雄性大白兔42只,体重2.0±0.5kg,适应性喂养7天,简单随机抽样法分6组:正常组(A组,n=3)和实验组,实验组分为损伤组(B组,n=3)、损伤后第5天按摩组(C组,n=9)、损伤后第5天自然恢复组(D组,n=9);损伤后第10天按摩组(E组,n=9)和损伤后第10天自然恢复组(F组,n=9)。A组兔子不作任何处理,为正常对照;其余5组兔子用自制打击器制备左后肢股四头肌损伤模型。自然恢复组不予按摩,造模后第4天对按摩组动物按摩。HE染色及超声影像技术观察损伤骨骼肌组织病理变化,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PLA2mRNA、MyoD mRNA和MYR5mRNA;蛋白质印迹技术(Westen blot)检测VEGF的表达。结果超声微泡造影及HE染色显示,按摩组较自然恢复组血管恢复较快,血供较丰富,坏死区明显减轻。VEGF在损伤后修复过程中,实验组同正常组相比,差异均具有明显统计学意义(P<0.01);经按摩治疗,损伤后第5天和损伤第10天,按摩组同自然恢复组相比,表达水平明显增加,差异均具有统计学意义(P <0.01)。损伤第5天及损伤第10天按摩组和自然恢复组的GSH-Px和MPO活力值经比较,按摩组较自然恢复组明显减少,差异具有显著性(P<0.05);经按摩干预后,各组的PLA2mRNA表达量也显示按摩组明显比自然恢复组减少,差异具有显著性(P<0.05)。损伤后第5天和损伤后第10天,按摩组与自然恢复组比较,成肌调节因子Myf5mRNA、MyoD mRNA的表达均明显增加,差异均具有显著性(P<0.01)。结论按摩可有效促进血管生成,促进兔损伤股四头肌的肌胶原纤维合成,防止损伤骨骼肌细胞的萎缩和坏死,利于损伤组织的修复。其机制可能是:①按摩使VEGF的表达增加,促进新生血管生成,从而有利于骨骼肌损伤修复损伤区域的血液供应;②通过加快清除损伤后自由基的产生,降低PLA2活性来保护细胞结构完整性,减轻疼痛;③促进成肌调节因子Myf5mRNA和MyoD mRNA的表达,利于骨骼肌肌纤维的生成。
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