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目的:第一部份:观察增殖期糖尿病视网膜病变(PDR)病人血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平,为本研究的第二部分提供参考依据。第二部份:观察水蛭提取液对凝血酶诱导的恒河猴视网膜——脉络膜血管内皮细胞(RF/6A)分泌TNF-α的影响,初步探讨水蛭在预防视网膜新生血管生成中的作用机制。从而为药物预防视网膜新生血管性疾病提供实验依据。方法:第一部份:将实验组30例PDR病人,对照组30例健康人,分别采集空腹血清通过ELISA方法检测TNF-α含量。第二部份:①采用消化培养法,对RF/6A细胞进行体外传代培养②随机分成凝血酶诱导组(凝血酶浓度20 NIHU/ml)和空白对照组。孵育RF/6A细胞不同时间(2,4,6,8,10,12,24小时)后,用ELISA法检测TNF-α含量。③随机分为4个组:凝血酶组(凝血酶浓度20 NIHU/ml),水蛭提取液组(水蛭提取液浓度64mg/ml),合药组,空白对照组。孵育RF/6A细胞10小时后,用ELISA法检测TNF-α含量。结果:(1)实验组血清TNF-α水平(137.92±4.14pg/ml)比对照组(50.04±1.75 pg/ml)升高,差异有统计学意义(P＜0.05)。(2)凝血酶诱导组的TNF-α含量在2,4,6,8,10小时较空白对照组升高,差异有统计学意义(P＜0.05),在12,24小时与空白对照组比较差异无统计学意义(P＜0.05)。(3)不同药物干预下TNF-α含量的比较:①凝血酶组(0.07517±0.00207)与空白对照组(0.06133±0.00275)相比TNF-α含量升高,差异有统计学意义(P＜0.05)。②水蛭组(0.03933±0.00313)与空白对照组相比TNF-α含量降低,差异有统计学意义(P＜0.05)。③合药组(0.04467±0.00160)与凝血酶组相比TNF-α含量降低,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论:(1) TNF-α是与PDR相关的细胞因子。(2)中药水蛭提取液能抑制体外培养的RF/6A细胞分泌TNF-α。推测水蛭提取液能从抑制TNF-α分泌的途径预防视网膜新生血管的形成。为药物预防视网膜新生血管性疾病提供了实验依据。