银杏（Ginkgo biloba L.）为银杏科银杏属多年生落叶乔木,拥有近两亿多年的历史,被称为“活化石”。银杏的主要化学成分包括黄酮类、萜内酯类、酚酸类、聚异戊烯醇类等,具有抗缺血、抗氧化、抗惊厥和抗血小板激活因子的活性以及清除自由基、改善血流和保护血管等特性。本研究进一步探究了银杏叶和银杏枝的化学成分,并对不同品种银杏叶的化学成分进行定性和定量分析。同时,对银杏中主要成分银杏内酯抗PAF诱导的血小板聚集活性评价。主要研究方法、内容、结果如下:1.本文采用了一种快速识别、分离银杏内酯化合物的新方法。首先,开发了一种基于特征离子和中性丢失离子的分析策略,可用于全面分析银杏叶中具有类似银杏内酯子结构的化合物。其次,采用UHPLC-QTOF-HR-MS/MS检测银杏叶提取物经中性氧化铝色谱柱和硅胶色谱柱分离后的馏分,通过特征离子和中性丢失离子识别新的银杏内酯。然后对新的银杏内酯进行靶向分离。最后使用波谱数据、化合物理化性质和X单晶衍射晶体学鉴定了新的银杏内酯以及已知的银杏内酯。通过以上方法首先在分离的馏分中共发现了 41个银杏内酯类化合物,其中潜在新的银杏内酯类化合物30个,已知银杏内酯11个,接着通过硅胶柱色谱、ODS柱层析、Sephadex LH-20柱色谱和半制备HPLC对馏分进行了靶向分离,共得到并鉴定了 18个银杏内酯类化合物,分别为10个新的银杏内酯（化合物12、13、18、19、21、26、27、6、9和20）和8个已知的银杏内酯（银杏内酯A,银杏内酯B,银杏内酯C,银杏内酯J,银杏内酯P,银杏内酯Q,银杏内酯K,白果内酯）。在分离银杏内酯化合物的同时,分离得到了非银杏内酯类化合物40个,通过波谱数据和化合物理化性质分析,鉴定了其中37个化合物,分别为:穗花杉双黄酮（L1）,金松双黄酮（L2）,芹菜素（L3）,Epicycloolivil（L4）,Lasiandranins A（L5）,Lasiandranins B（L6）,邻苯二甲酸二丁酯（L7）,邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（L8）,异鼠李素（L9）,槲皮素（L10）,对苯二酚（L11）,芦丁（L12）,山奈酚（L13）,异鼠李素-3-O-葡萄糖（L14）,Hovetrichoside C（L15）,5-羟甲基糠醛（L16）,Ginkgoside B（L17）,Idaeusinol A（L18）,Ginkgoside A（L19）,（7S,8R）-Dihydro-3-羟基-8-羟基-甲基-7-（4-羟基-3-甲氧基苯基）-1-苯并呋喃丙醇（L20）,Ethyl-β-rutinosides（L21）,反式-3-（4’-羟基苯基）丙烯酰乙酯[（E）-3-（4-hydroxyphenyl）acrylic acid ethyl ester]（L22）,二氢松柏醇（L23）,对羟基苯乙酮（L24）,（+）-Cycloolivil（L25）,（+）-Epinoresinol（L26）,（-）-Epinoresinol（L27）,3-（4-羟基-3-甲氧基苯基）丙烷1,2-二醇（L28）,对羟基桂皮酸（L29）,N-（2-羟基苯基）-乙酰胺（L30）,（-）-表丁香树脂醇（L31）,（-）-丁香树脂醇（L32）,（+）-丁香树脂醇（L33）,3-羟基-4-甲氧基苯乙醇（L34）,对羟基苯甲醛（L35）,咖啡酸（L36）,阿魏酸（L37）。上述化合物中,有8个黄酮类化合物,10个木质素类化合物,1个呋喃酸类化合物,1个糖苷类化合物,3个生物碱类化合物,6个苯丙素类化合物,8个其他类化合物,其中化合物L4、L5、L6、L7、L8、L11、L15、L16、L18、L20、L21-L37为首次从银杏叶中分离得到。2.采用大孔树脂色谱柱、硅胶柱色谱、ODS柱层析、Sephadex LH-20柱色谱和半制备HPLC对银杏枝总提取物进行分离,共得到54个化合物,通过化合物的波谱数据和理化性质分析,鉴定了其中51个化合物,其中与银杏叶重复了 21个化合物,不重复的化合物有30个,分别为:芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷（Y1）、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸（Y2）、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸（Y3）、3-O-Methylisoamericanoic acid A（Y4）、cis-3-[2-[1-（3,4-dihydroxy-phenyl）-1-hydroxylmethyl]-1,3-ben-zodioxol-5-yl]-（E）-2-prope-noic acid（Y5）、没食子酸（Y6）、迷迭香酸（Y7）、（Y8）、（Y9）、银杏素（Ginkgetin,Y10）、异银杏素（Isoginkgetin,Y11）、芫花素（Genkwanin,Y12）、银杏酸（C15:1,Y13）、Bisbenzopyran（Y14）、Kerinol（Y15）、Evofolin B（Y16）、Cerberalignans L（Y17）、Arctignan F（Y18）、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷（Y19）、儿茶素（Y20）、山柰酚3-O-芦丁糖苷（Y21）、原儿茶醛（Y22）、原儿茶酸（Y23）、苯甲酸（Y24）、香草酸（Y25）、异香草酸（Y26）、山萘酚-3-鼠李糖甙（Y27）、Bilobetin（Y28）、Indol-3-ylacetylasparticacid（Y29）、硬脂酸（Y30）。上述化合物中,有2个银杏内酯类化合物,9个黄酮类化合物,9个酚酸类化合物,6个木质素类化合物,1个生物碱类化合物,其他类化合物3个。其中化合物Y8和Y9为新银杏内酯类化合物,化合物Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y14、Y15、Y16、Y17、Y18、Y19、Y22、Y23、Y24、Y25、Y26、Y29为首次从银杏枝中分离得到。3.为研究不同品种银杏叶化学成分差异,本文首先采用基于UHPLC-QTOF-MS/MS结合诊断离子和中性丢失策略的方法对银杏叶的化学成分进行分析,接着基于多种成分的定量结果结合统计学分析方法对不同品种银杏叶进行分析。该方法的具体步骤如下:（a）DPI光谱简化和NL过滤;（b）基于前体离子、诊断离子和中性丢失策略对银杏叶中的化合物进行分析;（c）定量分析不同品种银杏叶中的多个成分;（d）通过主成分分析（PCA）筛选差异性品种;（e）热图可视化用于直观银杏叶品种中多种化合物的含量分布,VIP得分分析找出引起不同品种间差异的主要化合物。结果:在银杏叶中共鉴定出110个化合物,包括17种有机酸、3种生物碱、15种银杏内酯和75种黄酮类化合物,其中包括42种首次在银杏叶中鉴定的化合物。在42种首次鉴定的化合物中,有6种是潜在新的化合物。此外,多组分定量分析和统计学分析成功筛选出两个特殊品种,即郯城231和无锡花叶,还有一个具有区域特征的品种:江苏泰兴品种。从VIP得分来看,10个主要导致银杏叶品种间差异的化合物（VIP＞1）分别为:化合物74、10、78、25、56、16、32、57、49和17。这10个化合物的含量对银杏叶产品质量有重要影响,其中化合物10、25、16、32和57为银杏叶中首次发现和报道的化合物。4.本文对分离得到的12个新的银杏内酯（化合物12、13、18、19、21、26、27、6、9、20、Y8和Y9）以及3个已知银杏内酯（银杏内酯A,31、银杏内酯B,33、银杏内酯C,32）进行抗PAF诱导的血小板聚集活性进行评价。实验以PAF作为血小板聚集诱导剂,将银杏二萜内酯分别加入采集的兔血中,采用比浊法检测各化合物对血小板凝集的抑制作用,初步探讨其构效关系。结果表明化合物31、33、32、12、13、18、19、21、26、6、9和20具有抑制活性,且呈量效关系,化合物27、化合物Y8和化合物Y9没有活性。基于银杏内酯A,银杏内酯B,银杏内酯C与化合物6、9和20的活性结果对比,以及化合物12和13的活性结果进行对比,发现银杏内酯的C-14位置的异构化（C-14位置的甲基处于β构型）可能会降低PAF诱导的抗血小板聚集活性。当化合物12和18、化合物13和19以及化合物21和26活性进行比较时,发现C-7位连接羟基时,可能会降低PAF诱导的抗血小板聚集活性。结论:（1）本研究在银杏叶和银杏枝中共分离得到112个化合物,鉴定了其中106个化合物,除去重复的21个化合物,确定了 85个化合物,其中12个新的银杏内酯类化合物,首次发现报道的化合物有44个。本论文丰富了银杏的药效物质基础。在本工作前国际上共报道银杏内酯类化合物仅11个,本论文将银杏内酯类化合物提升至23个。（2）本论文首次提出了一种新的识别银杏内酯化合物的方法,为银杏内酯类化合物的发现奠定基础。（3）基于UHPLC-QTOF-MS/MS结合诊断离子和中性丢失策略对银杏叶的化学成分进行分析,并基于多种成分的定量结果结合统计学分析方法对不同品种的银杏叶进行分析,为筛选不同品质的银杏叶品种提供了基础,也为临床中药用药的安全性及质量控制提供帮助。（4）研究了银杏内酯类化合物抗PAF诱导的血小板聚集活性,初步探讨了其构效关系,为银杏内酯类化合物的新药开发提供了基础。