新型隐球酵母菌(Cryptococcus neoformans)是一种条件性致病真菌,主要感染免疫功能缺陷人群。新型隐球酵母菌产生的孢子或干燥的酵母细胞可被吸入到肺组织进而积聚于肺泡中,当在机体出现免疫功能减低的条件下,其可通过肺组织向其它器官组织播散致全身系统性感染,当其穿透血脑屏障时,可至真菌性脑膜脑炎的发生。近年来,该病原菌已成为真菌性脑膜脑炎的主要致病菌,在每年约100万的新发病例中,约近60万感染者死亡。新型隐球酵母菌作为一种病原致病真菌,已日益显示出其在医学研究领域中的重要意义。此外,近年来新型隐球酵母菌已被发展成为一种模式生物,作为单倍体酵母细胞,其具有生长迅速,有性生殖周期明确,动物感染实验模型构建完备的特点,因而有助于研究真菌的遗传特性及致病机制。尽管许多关于新型隐球酵母有性生殖周期及其致病因子合成的信号传导通路调控机制的研究已经取得了重要的发现和进展,然而,由于真菌的致病机制是一个极其复杂的过程,我们仍需对其进行深入系统的研究。在真核细胞生物中,酪蛋白激酶家族蛋白质参与一系列细胞功能的调控作用,主要包括对其底物蛋白进行磷酸化,磷酸化的蛋白进而被UPS(ubiquitin-proteasome system)泛素蛋白酶体系统识别后降解。我们的先前的实验研究表明Fbpl,作为SCFFBP1E3ligase复合物的一个重要元件,对于新型隐球酵母菌的致病性具有重要作用。因为在对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的研究中已发现,Fbpl的同源蛋白Grrl,需要酪蛋白激酶Ⅰ(Yckl和Yck2)磷酸化其作用底物,进而将其识别并降解。因而,本实验专注于新型隐球酵母菌中酪蛋白激酶的功能研究。我们首先在新型隐球酵母菌中发现了酪蛋白激酶Ⅰ的同源蛋白Cckl。实验研究发现,与Fbpl相似,在不同交配型新型隐球酵母菌交配过程中以及葡萄糖的含量变化时,其对Cck1的表达呈负向调控。吸入感染模型动物实验表明,尽管cckl基因缺失菌株对典型的真菌毒力致病因子(黑色素的产生,荚膜的形成,37℃下的生长能力)的产生无影响,但该菌株致病性却显著减弱。cckl基因缺失菌株对SDS高度敏感,表明Cckl在对真菌细胞完整性的调控过程中必不可少。Cckl与Fbp1在某些功能上的重叠作用表明,Cckl可能参与于Fbpl作用底物的磷酸化过程。此外,cckl基因缺失菌株也表现出对细胞外高渗透压环境及氧化胁迫作用的敏感性,表明其同时参与维持真菌细胞完整性及细胞适应外界胁迫刺激作用的调控。我们的实验研究同时也发现,Cck1也参与Mpk1及Hog1有丝分裂原激活蛋白激酶MAPKs (mitogen-activated protein kinases)的磷酸化过程,表明Cck1通过Mpk1信号传导通路参与对细胞完整性的调控,通过Hog1信号传导通路参与细胞适应外界胁迫刺激的调控。因而,新型隐球酵母菌酪蛋白激酶Ⅰ Cck1调控多重细胞信号传导通路且其对真菌的致病性具有重要作用。