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本论文分三部分,第一、第二部分分别利用RNA分子信标与双功能分子信标构筑新型荧光生物传感器,实现了对蛋白和生物小分子灵敏检测；第三部分利用聚苯胺纳米材料构筑了新型电化学生物传感器,实现了同时对两种生物小分子的分离检测。1、通过结合哺乳动物argonaute2(Ago2)蛋白独特的剪切功能与RNA分子信标,发展了一种新的方法检测Ago2蛋白的RNA核酸内切酶的活性。Ago2蛋白能够与引导RNA形成RNA诱导沉默复合体(RISC),其表现出RNA核酸内切酶的活性。基于Ago2能够形成RISC复合物,进而对RNA分子信标进行酶剪切活动,使得荧光恢复,通过荧光方法实现简单灵敏检测Ago2活性。由于Ago2蛋白的特异性,此传感器对其他的蛋白表现出良好的选择性。在优化条件下,Ago2蛋白在1nM到25nM表现出良好的线性,检测限为0.6nM。2、通过目标物引发分子信标结构改变,基于荧光恢复构建了一种双功能荧光核苷酸探针检测小分子和蛋白的新方法。分子信标中环部分分别设计有凝血酶(Tmb)序列和三磷酸腺苷(ATP)适体序列,能够相应识别Tmb与ATP。没有目标物存在时,分子信标荧光基团与淬灭基团之间发生FRET过程,没有荧光发射。当目标物存在时(ATP或者Tmb),分子信标与目标物之间特异性作用,使得分子信标构型改变,荧光基团与淬灭基团之间距离加大,表现出荧光信号增大。因此,通过双功能分子信标实现了对ATP与Tmb的分别检测。ATP与Tmb的检测线分别为25nM与12nM。3、利用新型SiO2@AuNPs@PANI纳米复合物,构筑了尿酸(UA)与抗坏血酸(AA)的分离检测传感平台。在最优实验条件下,UA和AA峰电位差达到了384mV,实现了同时分离检测UA与AA。线性范围分别为5.0×10-6～1.1×10-3M和1.0×10-5～1.05×10-3M,检测限分别为2×10-6和6×10-6M。