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目的:面对日益恶化的环境和越来越大的生活压力,癌症的发病率在逐年攀升,寻找疗效确切的抗肿瘤药物刻不容缓。研究表明,蛋白甲基转移酶异常表达会导致组蛋白甲基化模式失衡并广泛促进人类癌症的发生发展。其中以组蛋白甲基转移酶（HMTs）,特别是G9a（常染色质组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶,EHMT2）为靶点的抗肿瘤药物研究为当前的研究热点。然而,目前G9a抑制剂的研究仍处于基础研究阶段,尚未有G9a抑制剂进入临床研究的报道。本课题研究目的是利用虚拟筛选的工作基础,寻找新型的G9a活性先导化合物,并进一步通过计算机辅助药物设计方法设计并合成相应的系列结构衍生物,通过抗肿瘤活性评价及构效关系分析,设计合成具有更高活性和选择性的G9a抑制剂,进而拓展G9a抑制剂的结构类型,为下一代抑制剂的研发提供了借鉴意义。目前,目标化合物的合成及抗肿瘤活性初步筛选工作已完成,目标化合物对G9a靶向性及机制研究正在进行中。方法:1、计算机虚拟筛选及先导化合物的确定利用虚拟筛选相关专业软件,根据G9a晶体结构（PDB:4NVQ）及其配体初步建立G9a药效团模型,并从Chembridge数据库中筛选出一定数量的小分子化合物,并将其对接到G9a蛋白受体上,最后选择结构差异较大且打分函数在一定的范围内的候选分子共50个作为研究对象。并对其抗H1299细胞株增殖活性进行评价及验证;选择药效团评价指数较高且初筛活性评价较突出的化合物作为先导化合物。2、基于先导化合物的结构优化设计及合成综合分析对接模型,对先导化合物的结构优化设计并设计合成路线。本文吲哚或3-氯甲氧基茴香醛为原料,经维尔斯迈尔—哈克反应、亨利反应等步骤,合成关键中间体,最后经皮克特—施彭格勒反应合成两个系列目标化合物共30个吲哚类生物碱。目标化合物的结构经高分辨质谱（MS）、核磁共振氢谱（1H-NMR）、核磁共振碳谱（13C-NMR）确证。3、目标化合物活性评价通过SRB法检测30个目标化合物的抗肿瘤活性。该方法以人非小细胞肺癌细胞H1299为测试细胞株,以G9a抑制剂BIX01294、UNC0642为阳性药,以化合物对细胞增殖的抑制率,评价化合物抗肿瘤活性。结果:1、通过虚拟筛选得到具有G9a抑制潜力的50个化合物,在10μM初筛浓度下,阳性药BIX01294和UNC0642的H1299抑制率分别为92.8%、76.7%;而候选化合物11687、27368和46490抑制率分别为95.5%、72.9%、68.8%,与阳性药抑制活性相当。进一步测定化合物11687、27368、46490半数抑制浓度IC50分别为2.99±0.26μM,7.81±1μM、小于0.78μM。综合药效团评价指数和抗增殖活性初筛结果,以化合物27368作为先导化合物。2、本文共合成30个吲哚类小分子化合物,本课题共设计合成了 42个中间体及30个目标化合物,经scifinder检索其中42个化合物未见报道。其中化合物1、2、3、4、13、14、15、16、17、19、22、23、24、25、26 对非小细胞肺癌 H1299 具有明显的抑制作用。结论:利用虚拟筛选确定G9a抑制剂的先导化合物,并进一步通过计算机辅助药物设计方法,优化设计并合成相应的系列结构衍生物30个,并对它们进行了结构表征;通体外抗肿瘤活性筛选实验发现化合物1、2、3、4、13、14、15、16、17、19、22、23、24、25、26对非小细胞肺癌H1299具有明显的抑制作用。以上结果为进一步G9a抑制剂的研究提供参考价值。