地黄饮子对Aβ诱导的PC12细胞钙离子通道及相关基因表达的影响

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:vlon126
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本课题拟用地黄饮子含药脑脊液作用于β-淀粉样蛋白(Amyloidβ-protein,Aβ)损伤的体外培养PC12细胞系,运用免疫细胞化学、生物化学、激光共聚焦技术及定量PCR等先进的检测手段和方法,从细胞及分子水平进一步探索了Aβ与老年性痴呆(AD)发生、发展密切相关的综合机制,观察地黄饮子对PC12细胞生存活力、细胞膜结构的变化、细胞凋亡的调控作用,从而全面深入探讨了地黄饮子防治AD的作用机理。本实验建立的Aβ25-35诱发PC12细胞损伤的模型符合当前国际标准的AD细胞模型,证实Aβ25-35引起细胞凋亡的神经毒性作用。实验结果表明:一、地黄饮子能有效改善PC12细胞生存状态,提高细胞的生存活力,改善由Aβ25-35诱导细胞所造成的细胞结构和功能上的病理改变。二、地黄饮子能明显降低PC12细胞受β-淀粉样蛋白刺激时APP的过度反应,降低APPmRNA的表达,从而抑制β-淀粉样蛋白损伤对PC12细胞的损伤。三、地黄饮子通过提高β-淀粉样蛋白所致PC12细胞nNOS蛋白的表达,提高NMDAR2B蛋白的表达水平,并抑制凋亡相关基因ICEmRNA的表达,从而抑制细胞凋亡的产生。四、地黄饮子能提高培养液中[Ca2+]i含量,抑制钙离子内流,提高Calbindin D的蛋白表达,抑制β-淀粉样蛋白损伤PC12细胞所致的钙超载现象,保护细胞膜结构。
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