医药产业的快速发展，越来越要求药物开发的高质量和高效率。近来在新药研究中，一方面出现了细胞水平高通量筛选体系，利用高度的自动化设备和直观简便的检测方法进行大规模的药物筛选，较传统的新药开发速度有了从量到质的飞跃。另一方面，在整体动物实验的药效评价中，特别对于神经-精神系统药物的评价采用计算机辅助方法，可以提高客观、定量程度和研究效率。因此，要建立神经系统创新药物研制技术平台，需要解决药物体外高通量筛选方法以及整体动物实验药效评价的客观、定量和高效率问题。根据药物研制中的上述要求，结合本实验室现有条件，我们利用计算机视频跟踪系统和本实验室开发的图像分析软件研究NIH、ICR、昆明种小鼠开场实验自发活动特点，并以戊巴比妥为工具药建立了计算机辅助开场实验对中枢抑制药的新评价模型：此外，在细胞水平我们用微孔板酶标检测仪，建立了96微孔板NMDA诱导的神经元损伤保护药物筛选模型，为本实验室神经系统创新药物研制技术平台的建立打下基础。 1、整体水平药效客观评价：建立计算机辅助开场实验对中枢抑制药的新评价模型 用开场实验观察小鼠进入新环境的自发活动特点，并用计算机图像处理系统记录，分析小鼠30min内的活动轨迹，观察不同时间段的总路程、中央逗留时间、中央路程3个参数。还观察了腹腔注射不同剂量戊巴比妥对自发活动特点的影响。结果发现，各种小鼠总路程在前10min明显大于后20min(P<0.001)；中央逗留时间和中央路程变化较小，但存在一定的品系和昼夜差异。戊巴比妥可减少ICR和NIH小鼠(昆明种小鼠无效)的总路程，但无典型浙江大学硕士学位论文的量效关系；但可剂量依赖性减少各种小鼠中央逗留时间和中央路程（尸＜0刀1）。表明我们建立的方法能反映小鼠自发活动特点，并可用于评价中枢抑制药作用，其中中央逗留时间和中央路程是稳定、敏感的指标。 2、细胞水平高效率药效评价：建立96微孔板神经元损伤保护药物筛选模型 用 96微孔板原代培养的新生大鼠神经元体外培养至第 10天（DIV）时，用不同浓度的NMDA处理不同时间，以形态学和MTT染色为指标观察神经元的损伤情况。并观察了NMDA受体桔抗剂氯胺酮和抗炎症药米诺环素（minocycline）对 50 pmol几 NMDA处理 3 h造成的皮层神经元急性损伤的作用以及minocycline对正常皮层神经元的影响。结果表明，随着NMDA浓度的增加和作用时间的延长，其神经毒性增加。氯胺酮 100、10、lpmol／L和 minocycline 135、45 pmol几预处理对 50 pmol几 NMDA处理 3 h造成的皮层神经元急性损伤有明显的保护作用（P＜0．of）；但是minocycline在NMDA处理后给药则无保护作用。Minocycline 135、45 pmol／L作用 24 h对 DIV4、DIV7、DIV10的神经元都有一定的毒性（P＜0．of），但神经元体外培养的时间越长，毒性越小；但是 Minocycline 135、45 pmol几作用 3 h对 DIV10的神经元无明显影响。这一结果表明，96微孔板培养的原代神经元可以用于评价药物对神经元损伤的保护作用及对神经元的毒性作用。 3、结 论 本实验第一部分用计算机辅助开场实验建立了中枢抑制药的新评价模型，该模型可客观、定量、灵敏地评价中枢抑制药作用，其中中央逗留时间和中央路程是稳定、敏感的指标。第二部分用NMDA诱导皮层神经元损伤建立了保护药物96微孔板筛选模型，并以氯胺酮为阳性药验证了模型的可靠性。在该模型基础上证明了minocycline高剂量对NMDA诱导的皮层神经元损伤有保护作用，但对正常皮层神经元有毒性作用。