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目的:从中医外治法角度,探讨经验方热哮方俞募配穴贴敷对哮喘小鼠Th17/Treg失衡的影响。方法:利用卵清蛋白(OVA)致敏和激发制备急性期支气管哮喘发作模型,雌性BALB/C小鼠60只随机分成6组:正常对照组、模型组、热哮方俞募配穴贴敷组、安慰剂俞募配穴贴敷组、热哮方假穴位贴敷组、阳性对照组,每组10只。除正常对照组外,其他组利用OVA进行哮喘模型制备。在每次OVA激发前6h,热哮方俞募配穴贴敷组给予热哮方贴剂双侧肺俞中府贴敷治疗、安慰剂俞募配穴贴敷组给予面团双侧肺俞中府贴敷治疗、热哮方假穴位贴敷组给予背部任意位置热哮方贴敷治疗,阳性对照组予地塞米松灌胃治疗。观察各组小鼠行为学、体重变化情况。末次雾化激发24h内处死小鼠,取血液、肺组织。HE染色观察肺组织病理学变化;ELISA法检测血清IgE表达及Th17/Treg相关细胞因子IL-17、IL-10表达水平;免疫组化法检测Th17/Treg特异性转录因子RORγt、Foxp3的蛋白表达情况并计算比值。结果:1.小鼠行为学变化:与模型组比较,热哮方俞募配穴贴敷组小鼠的挠鼻、喘息、烦躁不安等症状有所减轻;而安慰剂俞募配穴贴敷组、热哮方假穴位贴敷组无明显差别。2.小鼠体重变化:激发前,各组体重无明显统计学差异(P>0.05);激发14天后,与模型组比较,其它各组均在一定程度升高,热哮方俞募配穴贴敷组体重显著增高(P<0.05)。3.HE染色观察肺组织病理结果:模型组小鼠的支气管、肺泡内及血管周围出现较多炎性细胞浸润,粘液腺增生,气道上皮断裂,肺间质和支气管腔内可见炎性细胞渗出和分泌物,部分有粘液栓形成。与模型组比较,热哮方俞募配穴贴敷组上述病理学的表现明显减轻;安慰剂俞募配穴贴敷组、热哮方假穴位贴敷组无明显差别。4.ELISA检测血清IgE、IL-17、IL-10含量结果:与正常对照组比较,模型组血清IgE含量显著升高(P<0.05)。与模型组、安慰剂俞募配穴贴敷组、热哮方假穴位贴敷组比较,热哮方俞募配穴贴敷组IgE含量显著下降(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组IL-17含量显著升高(P<0.05),IL-10含量显著下降(P<0.05)。与模型组、安慰剂俞募配穴贴敷组、热哮方假穴位贴敷组比较,热哮方俞募配穴贴敷组IL-17含量显著下降(P<0.05),IL-10含量显著升高(P<0.05)。5.免疫组化检测肺组织Th17、Treg特异性转录因子RORγt、Foxp3蛋白表达结果:与模型组、安慰剂俞募配穴贴敷组、热哮方假穴位贴敷组比较,热哮方俞募配穴贴敷组RORγt蛋白表达显著减少(P<0.05),Foxp3蛋白表达显著升高(P<0.05),RORγt/Foxp3蛋白表达比值显著降低(P<0.05)。结论:1.热哮方俞募配穴贴敷可减轻激发阶段哮喘小鼠急性期发作症状,减少气道炎性细胞浸润,改善体重,从而缓解哮喘发作。2.热哮方俞募配穴贴敷可能通过降低哮喘小鼠血清细胞因子IL-17的水平,升高IL-10的水平,从而起到调节Th17/Treg平衡失调的作用。3.热哮方俞募配穴贴敷可能通过下调哮喘小鼠肺组织RORγt、蛋白表达水平,升高Foxp3蛋白表达水平,从而起到调节Th17/Treg平衡失调的作用。