RNA甲基化酶METTL16在结肠癌中的表达及对结肠癌细胞生物学功能的影响

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目的:研究甲基转移样酶16(Methyltransferase like 16,METTL16)对结肠癌细胞生物学功能的影响,以探索METTL16的表达与结肠癌发生发展之间的关系。方法:利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据集进行生物信息学分析,比较结肠癌组织和相邻正常结肠组织之间的METTL16表达数据。采用实时荧光定量PCR(Quantitative real time polymerase chain reaction,q RTPCR)检测METTL16 m RNA在结肠癌组织与癌旁组织中的表达情况。运用慢病毒转染技术,建立稳定表达的METTL16高表达,干扰的结肠癌细胞系。验证稳转的结肠癌细胞系中RNA甲基化水平以及METTL16m RNA及蛋白的表达情况。体外通过CCK-8细胞增殖实验、克隆形成实验、划痕实验、transwell迁移侵袭实验、细胞周期检测实验研究METTL16对结肠癌细胞增值,迁移,侵袭能力的影响。体内通过裸鼠成瘤实验进一步探究METTL16对结肠癌形成及发展的作用。结果:METTL16表达在结肠癌组织中m RNA水平较癌旁组织高(P<0.05)。METTL16的表达和细胞内RNA甲基化水平呈正相关。体外细胞功能学实验表明过表达METTL16能够增加结肠癌细胞的增殖能力,促进结肠癌细胞的迁移侵袭,敲低与之相反。敲低METTL16使结肠癌细胞G1期阻滞,抑制细胞增殖。体内裸鼠成瘤实验中,接种METTL16敲低组细胞的小鼠,皮下肿瘤体积和重量均明显小于对照组。结论:METTL16在结肠癌细胞中可能作为促癌基因,提示其可做为临床治疗结肠癌的作用靶点。
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