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目的:研究肿瘤抑制基因XAF1对肺腺癌细胞A549的生长、增殖、凋亡、放射敏感性的影响,为基因治疗肺癌提供理论依据。方法:本研究通过培养肺腺癌A549细胞株,利用重组腺病毒Ad5/F35-XAF1介导转染A549细胞,分别用MTT、流式细胞术(FCM)测定转染前后细胞增殖、凋亡变化,用RT-PCR和Western Blot法检测转染前后XAF1、DR4的mRNA和蛋白的表达。另外,本研究将转染前后细胞进行照射处理,用流式细胞术及克隆形成实验观察XAF1对A549放射敏感性的影响。结果:(1)重组腺病毒Ad5/F35-XAF1转染A549细胞后,细胞死亡率随其浓度的增加而增加。(2)RT-PCR及Western Blot法发现转染后的A549细胞中XAF1及DR4的表达呈剂量依赖性增高,且均高于PBS及Ad5/F35-Null转染的A549细胞中的表达量。(3)通过MTT法检测,XAF1呈剂量和时间依赖性抑制A549细胞的增殖。(4)通过FCM法检测细胞凋亡率,XAF1呈剂量和时间依赖性诱导A549细胞的凋亡。(5)XAF1与放射照射对A549细胞处理,通过FCM法检测发现,XAF1与放射照射联合应用后可大大提高细胞的凋亡率。(6)通过单克隆形成实验发现,重组腺病毒Ad5/F35-XAF1转染处理A549细胞后,A549细胞的放射敏感性明显升高,而PBS组和Ad5/F35-Null组对其敏感性无明显影响。结论:(1)腺病毒Ad5/F35-XAF1和报告病毒Ad5/F35-EGFP对A549细胞有很强的转染性,能成功对其进行瞬时转染,该病毒是一种很好的基因载体。(2)XAF1的表达甚至过度表达可提高A549细胞凋亡率,XAF1有望成为治疗肺癌的理想靶基因。(3)A549细胞中,XAF1表达增加的同时伴随着DR4的表达的增加,表明XAF1与TRAIL的联合应用可能能更好地治疗肺腺癌,甚至XAF1有可能可在逆转TRAIL的耐药中起到一定的作用。(4)高表达XAF1的A549细胞,其放射敏感性同样增高,XAF1可能成为肺腺癌的放疗增敏剂。