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本文在对光镊进行简要介绍的基础上,重点展开对光镊使用不同放大倍率显微物镜对细胞的捕获能力的分析和光镊与膜片钳结合用于研究细胞电特性的初步研究。
绪论内容为光镊的发展历史、原理、特点、新技术、应用、及其与其他研究仪器的结合。
第二章内容为常规单光束梯度力激光光镊仪器的主要部件的详细介绍,以及对不同的位置探测和捕获力的测量手段的介绍。
第三章内容为应用上海中珂光镊科技有限公司生产的LOTII型光镊,利用热力学平衡原理对光捕获力的实际测量。比较采用数值孔径为0.65的40X物镜和数值孔径为1.25的100X物镜的捕获实验结果,发现100X物镜在侧向和轴向上的捕获能力均强于40X物镜。在其他实验条件,包括入射捕获光功率,被捕获的细胞等,不变的情况下,用100X物镜得到的光势阱刚性系数比40X物镜的大。100X物镜在捕获效率上和对捕获酵母菌细胞在轴向的限制能力上都强于40X物镜。100X物镜捕获能力强还表现在实验中操作被捕获细胞更加流畅的特性中。因此光镊仪器应尽量使用放大倍率高的、数值孔径大的显微物镜进行光捕获,以便得到高的捕获效率和流畅的操作。
第四章内容为基于提高对细胞的电生理特性的研究采用LOTII型光镊仪器与EPC-10型膜片钳仪器结合的初步实验。实验中在捕获细胞后,膜片钳针尖接近细胞,推动细胞,但不推离光势阱,根据光镊的刚性系数推算针尖对细胞的作用力。这个结果可以为压力器中施加的压力做定量的标定。
根据光镊对酵母菌细胞的捕获实验和与膜片钳结合的研究,发现光镊在生物研究领域拥有很广阔的应用前景,它将更深一步地为人们了解生命科学提供研究手段。