目的:分子流行病学研究提示人乳头状瘤病毒(HPV)感染与部分口咽癌的发病相关,而HPV感染在喉癌发病中的作用尚不明确。本研究旨在明确我国HPV感染与喉癌发病风险的相关性,获得喉癌HPV感染率和型别分布。方法:收集300例喉鳞癌(病例组)及300例声带息肉(对照组)患者的冰冻组织标本、石蜡组织标本及流行病学资料,提取冰冻组织标本中的DNA,运用短PCR片段10(SPF10)聚合酶联反应(PCR)技术检测标本中各型HPV感染情况,运用荧光定量PCR检测病毒载量及病毒整合状态,采用免疫组化(IHC)检测石蜡标本中P16蛋白的表达情况。结果:病例组HPV(所有型别)感染率高于对照组(7.0%vs3.3%,调整后的比值比aOR=2.37,95%CI:1.08-5.21)。病例组HPV16感染率高于对照组(6.7%vs2.7%,aOR=2.84,95%CI:1.21-6.68)。HPV16 感染相关喉癌的发病风险在55岁以下、男性、无吸烟史和无饮酒史的患者中更高,aOR分别为3.52(95%CI:1.07-11.54),4.74(95%CI:1.33-16.90),5.57(95%CI:1.41-22.10)和3.72(95%CI:1.09-12.72)。病例组所有HPV16DNA(20例患者)均部分或完全处于整合状态,而对照组HPV16 DNA均为游离状态。但是两组HPV16阳性患者的病毒载量并没有显著差异(P=0.28)。病例组中有31例患者(10.3%)P16蛋白IHC阳性,20例HPV阳性喉癌患者除1例外均过表达P16蛋白,而对照组中没有检测到P16蛋白的表达。结论:HPV16在喉癌患者人群中感染率更高,HPV16感染在部分喉癌的发生及发展过程中可能具有重要意义。P16蛋白与HPVDNA检测方法在喉癌中的一致性较差,可能不能通过单一检测P16蛋白的过表达来判断喉癌中是否存在HPV感染。目的:探讨口咽癌中CD8+TILs浸润程度及PD-1、PD-L1的表达与HPV感染状态及患者预后的相关性。方法:采用倾向性评分匹配,纳入HPV阳性及HPV阴性口咽鳞癌各50例,对患者进行长期随访,通过免疫荧光检测CD8+TILs的浸润程度及PD-1、PD-L1的表达,分析其与HPV感染状态及临床预后的相关性。结果:HPV 阳性组患者预后较HPV阴性组患者明显改善[总生存期(OS),P=0.002;疾病特异性生存期(DSS),P=0.001],5年OS率分别为66%和40%,5年DSS率分别为 73%和 44%。CD8+TILs 的浸润程度(P=0.039)及 PD-1(P=0.044)、PD-L1(P=0.005)的表达在HPV阳性组较HPV阴性组明显升高。CD8+TILs高浸润(aHR=0.38,95%CI0.20-0.73,P=0.003)及PD-L1 阳性(aHR=0.43,95%CI 0.22-0.82,P=0.008)为口咽癌OS的独立良好预后因素,DSS分析结果类似。进一步分组生存分析提示,HPV+/CD8+TILs高浸润者较HPV+/CD8+TILs低浸润者(DSS,P<0.001;OS,P<0.001)、HPV-/CD8+TILs 高浸润者(DSS,P=0.009;OS,P=0.028)以及HPV-/CD8+TILs低浸润者(DSS,P<0.001;OS,P<0.001)均具有显著的预后优势。同样,HPV+/PD-L1+患者较HPV+/PD-L1-者(DSS,P<0.001;OS,P=0.004),HPV-/PD-L1+者(DSS,P=0.009;OS,P=0.039)以及HPV-/PD-L1-者(DSS,P<0.001;OS,P<0.001)具有显著的预后优势。结论:HPV阳性口咽癌患者预后明显改善,CD8+TILs的浸润程度及PD-L1的表达在HPV阳性较HPV阴性口咽癌患者明显升高,CD8+TILs的浸润程度及PD-L1的过表达可能与HPV阳性口咽癌患者较好的临床预后相关。