【目的】研究小鼠睾丸支持细胞中UHRF1在精子发生中的作用。【方法】利用免疫荧光方法分析UHRF1在人和小鼠睾丸支持细胞中的表达和定位,并利用Cre/Loxp系统构建小鼠条件性敲除支持细胞中Uhrf1基因的模型,进一步探究小鼠支持细胞中UHRF1对精子发生的影响。【结果】UHRF1在人和小鼠睾丸部分不成熟支持细胞中表达,而在成熟支持细胞中不表达,体外促增殖环境可诱导成熟原代支持细胞UHRF1重新表达。支持细胞Uhrf1敲除导致雄性小鼠睾丸体积明显变小,生殖细胞凋亡、数量减少,大量不成熟生殖细胞从生精小管上皮脱落,从而造成雄性不育,但支持细胞UHRF1缺失对早期生殖细胞增殖分化不产生影响。【结论】UHRF1主要在人和小鼠睾丸中不成熟的支持细胞核中表达,可能参与支持细胞的增殖调控;支持细胞中UHRF1对生殖细胞的发育有着重要的调控作用,其功能缺失将导致不成熟生殖细胞从生精小管上皮脱落,并伴随大量生精细胞的凋亡,从而造成精子发生异常和雄性不育。【目的】探讨支持细胞中Uhrf1对支持细胞结构和功能的影响及其构筑的生精微环境调控生精细胞发生的具体分子机制。【方法】利用条件性敲除动物模型、免疫荧光、RNA-seq及DNA甲基化测序分析等技术来研究UHRF1在睾丸支持细胞中的调控作用机制。【结果】支持细胞Uhrf1敲除后,支持细胞的增殖能力在P3至P5时期降低,之后增殖能力无明显改变,后期分化成熟相对有所延迟;Uhrf1敲除的支持细胞极性消失,F-actin分布紊乱,在圆形精子周围大量异常聚集,尤其是在精子发生的第I-VIII期;Uhrf1缺失同时导致支持细胞内脂滴异常堆积,脂代谢异常,睾丸血-睾丸屏障受损,支持细胞与生殖细胞粘附与沟通遭破坏;Uhrf1缺失的支持细胞中大部分与细胞外基质构成和细胞黏附相关基因表达显著上调,同时伴随部分转座子的大量异常激活,尤其是IAP转座子;过表达细胞外基质和细胞黏附相关基因同样会破坏支持细胞骨架结构及支持细胞-生殖细胞间连接,导致大量不成熟支持细胞从生精小管上皮脱落。【结论】Uhrf1作为表观遗传调控因子主要调控支持细胞的DNA甲基化,控制支持细胞细胞外基质和细胞间黏附相关基因的甲基化水平,调节支持细胞和生殖细胞间的连接和沟通,对精子发生是必需的。支持细胞UHRF1功能一旦缺失,支持细胞细胞微观结构、细胞极性及脂质代谢受损,进而诱发支持细胞-生殖细胞连接沟通出现障碍,最终导致生殖细胞大量脱落,精子发生异常和雄性不育。