论文部分内容阅读
目的：探讨低压电脉冲(low voltage electric pulses,LVEPs)刺激对B16F10黑色素瘤荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用。方法：1)采用B16F10黑色素瘤细胞于BALB/c小鼠背部皮下成功构建荷瘤动物模型,并随机均分为4组：对照组、电脉冲(10hz、20hz、 30hz)刺激组。2)设定相对安全的刺激电压30 V、脉宽1ms,用不同频率(10hz、20hz、30hz)的电脉冲作用于处理组小鼠,以30min/d连续电刺激20d。3)每日测量各组肿瘤结节最长径a、最短径b,计算体积值及其相应抑制率,并制作出各组肿瘤结节体积增长的变化曲线。4)经20d电刺激,将各电刺激组和对照组小鼠的黑色素瘤组织进行HE染色并于光镜下观察其形态学变化。5)采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定各组黑色素瘤组织中半胱天冬蛋白酶-3(caspase-3)和基质金属蛋白酶-9(Matrix Metalloproteinase-9,MMP-9) mRNA的表达变化。6)采用免疫组织化学染色法半定量检测各组黑色素瘤组织中caspase-3和MMP-9蛋白的表达变化。结果：1)经电压30 V、脉宽lms、不同频率(10hz、20hz、30hz)的电脉冲刺激后,与对照组相比：在电刺激7d时30hz组小鼠的肿瘤体积缩小(P<0.05)；在电刺激14d时20hz组、30hz组小鼠肿瘤体积缩小(P<0.05)；在电刺激20 d时各电刺激组肿瘤体积缩小(P<0.05),且(10hz、20hz、30hz)刺激组的抑制率分别为18.75%、32.03%、63.12%。2)经20d电刺激,光镜下可见电刺激组肿瘤细胞密集度下降、核固缩、坏死较对照组多,变化随着频率增大而明显。3)各电刺激组caspase-3 mRNA及蛋白质表达增加；MMP-9 mRNA及蛋白质表达降低,且caspase-3、MMP-9表达强度变化随着频率增大而增强。结论：低压电脉冲刺激可抑制黑色素瘤小鼠肿瘤体积的增长,同时促进caspase-3表达增强,MMP-9表达减弱。