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目的:观察消异方对子宫内膜异位症大鼠异位内膜组织形态学、VEGF、survivin、Caspase3和细胞凋亡倾向的影响,探讨消异方治疗子宫内膜异位症的作用机制,为其临床应用提供重要依据。
方法:选用3月龄的SD雌性大鼠80只,体重200±20g/只,适应性喂养7天。7天后起每日晨7点镜下观察其阴道涂片,建立其动情周期档案。对动情期大鼠进行自体移植法手术造模,造模后4周,剖腹探查异位内膜存活与否。选择造模成功的大鼠随机分为8组进入实验,按以下方案给药:(1)空白对照组:自由饮食、饮水。(2)假手术组:生理盐水,1ml/100g灌胃。(3)模型组:生理盐水,1ml/100g灌胃。(4)散结镇痛胶囊组:散结镇痛胶囊混悬液,含生药0.05g/ml,按1ml/l00g灌胃。(5)米非司酮组:米非司酮混悬液,含生药2mg/ml,按1ml/l00g灌胃。(6)中药低剂量组:含生药1.125g/ml,按1ml/l00g灌胃。(7)中药中剂量组:含生药2.25g/ml,按1ml/l00g灌胃。(8)中药高剂量组:含生药4.5g/ml,按1ml/l00g灌胃。上述给药方法均采用1次/d,连续灌胃28天。于末次给药后24小时,10%水合氯醛(0.3ml/100 g)腹腔过量麻醉处死,取出正常子宫和异位内膜组织,甲醛固定,石蜡包埋切片(5um),分4组,分别用于免疫组化VEGF、survivin、Caspase3的检测和细胞凋亡TUNEL检测。
结果:1.造模大鼠异位内膜肉眼观体积较大,米非司酮组、散结镇痛胶囊组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,与模型组比较出异位内膜体积明显缩小。2.消异方各组异位内膜的血管内皮生长因子VEGF的表达比模型组显著性降低(P<0.05)。3.消异方各组异位内膜的凋亡抑制基因survivin表达比模型组显著性降低(P<0.05)。4.消异方各组异位内膜的Caspase3表达比模型组显著性提高(P<0.05)。5.消异方各组异位内膜细胞凋亡率均高于模型组,有显著性差异(P<0.05)。
结论:1.消异方能够抑制异位子宫内膜生长,且消异方高剂量组效果最明显。2.消异方能够抑制异位子宫内膜合成和分泌VEGF的能力,从而抑制子宫内膜异位症的发生。3.消异方通过激活细胞中的Caspase酶原活性,进而诱导细胞发生凋亡,促使异位内膜坏死脱落。4.消异方通过降低survivin 在EM中的高表达,使凋亡通路下游的Caspase3,7发挥抗凋亡作用直接减弱,从而抑制了异位内膜的增长。5.通过细胞凋亡TUNEL法检测,了解消异方明显抑制异位内膜生长的作用是通过诱导异位内膜细胞凋亡的方式来实现的。