卵寄生真菌虫草棒束孢几丁质酶基因IFCHI1克隆与生物信息分析

来源 :青岛农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangtian575
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
根结线虫病是一种在全球范围内均有发生的危害性相当严重的植物寄生线虫病害。而常用的化学杀线剂不但污染环境,且对人畜有害,同时大量使用化学类产品使根结线虫的抗药性不断增强,药剂防治效果降低,并且许多杀线剂如溴甲烷等已被禁止在农作物种植生产方面使用。对环境友好的可持续治理—生物防治正在逐渐发展成为植物根结线虫防治方案中的主导方法。  利用根结线虫的天敌微生物(如真菌等)进行根结线虫病害防治,是目前生物防治方法中的主要手段,本研究通过利用形态学及分子生物学方法对菌株HNE3分析鉴定,结果显示分离自河南三门峡渑池县烟草根结线虫卵上的真菌 HNE3为虫草棒束孢I.farinosa。该菌在几丁质酶诱导培养条件下表现了较高的产酶活性,并第6d达到产酶高峰(19.3U/mL)。通过 WA培养基进行卵寄生实验,发现在接种6d后的寄生率高达81.3%。利用几丁质酶培养滤液处理根结线虫的卵,在第7d对其孵化抑制率可达84.11%。  为研究卵寄生真菌 HNE3在寄生并破坏卵的过程中几丁质酶的作用,本研究采用RT-PCR及RACE技术,首次克隆得到一个几丁质酶基因IFCHI1。该基因DNA序列全长1417bp,具有1个内含子,长度为61bp,包含1个1185bp的开放阅读框(ORF),编码1个由394个氨基酸组成的蛋白。通过在线软件分析,该蛋白理论分子量为44.1kD,等电点为4.88。通过GenBank比对,几丁质酶IFCHI1属于第18家族糖基水解酶,比对分析不同来源真菌几丁质酶,发现该几丁质酶具有典型的催化区保守序列SIGGW和DFDGXDIDWE及结合区保守序列GXWEXGXXDYK和GLGGXMWWE。同源性比对发现,该几丁质酶同昆虫寄生真菌几丁质酶同源关系近。通过酶学活性分析,该菌热稳定性及耐酸碱稳定性,且加入金属离子(如Mg2+等)能够显著增加酶活。  本研究为进一步明确该菌产生的几丁质酶对南方根结线虫卵壳降解及降低孵化率的作用机理提供理论依据。
其他文献
摘 要:伴随着社会的进步和经济的不断发展,人民在物质生活充分提高的同时,对于精神生活也有了更高的要求。在世界多元化的大趋势下,新闻对人们的生活变得越来越重要,并且随着时代的不断进步,人们对于新闻的需求越来越来高,市场竞争也越来越激烈,这就促使电视新闻工作者进行新闻编辑工作的过程中,要不断提高新闻编辑的创新能力。因此,本文主要从现代我国电视新闻编辑存在的不足出发,针对其具体存在的问题,对具体的电视新
一、中小学图书馆为什么是学校的“精神高地”  中小学图书馆从来没有像时下这样受到过社会的广泛关注,以色列每人年平均阅读量是60本,日本是40本,法国是20本,而我们国家仅为4.35本,除了教科书,仅为1本。所以现在我们国家孜孜不倦热力倡导全民阅读,想利用文化的仪式凝聚着文化的情感。朱永新有句最知名的观点:“一个人的精神发育史就是他的阅读史,一个民族的精神境界很大程度上取决于这个民族的阅读水平。”所
摘 要:随着经济的发展,我国城镇化化进程较快,其中还包括对小城镇的规划与建设,其具体工作中,管理是提高小城镇规划建设的重要保障。基于此,本未将具体分析小城镇规划建设在管理工作中存在的困境,然后从提升承载能力、完善管理体制两方面入手,深入探究优化新型城镇化进程中的小城镇规划建设管理的措施,旨在发挥管理作用,提高小城镇规划建设的质量与效率,为相关工作人员提供参考。  关键词:新型城镇化;小城镇规划;建
摘 要:我国在现阶段的社会发展中,各个行业保持在平衡发展的阶段,很多内容都未出现严重的缺失与不足。从工业的角度来分析,维修钳工是精细化的工作团体,他们对于很多工作都具有决定性的影响。因此,提高维修钳工的操作技能,是非常必要的工作。文章就此展开讨论,并提出合理化建议。  关键词:提高;维修;钳工;操作;技能  现阶段的维修钳工,其面临的工作挑战是比较多的,不能总是按照自身的经验来完成工作,还必须从长
摘 要:在跆拳道比赛中,高水平跆拳道运动员需要经过专业的训练从而掌握跆拳道的運动学习内容,通过进行跆拳道专项素质的训练,从而赢得跆拳道比赛。因此,在跆拳道训练中,力量素质与反应速度是跆拳道运动员的训练重点。本文就高水平跆拳道运动员反应速度训练方法以及高水平跆拳道运动员反应速度效果检验进行如下论述。  关键词:高水平跆拳道运动员;反应速度训练;效果检验  跆拳道的反应速度训练是要求运动员按照动作的技
摘 要:传感器在生活中的研究与应用,传感器在农业环境、医疗卫生、公共交通、工业生产等得到了广泛的应用,传感器稳定性好,容易使用,设备精简测量精确,使用范围极广。本文主要对其应用方面进行了研究并举例。  关键词:传感器;应用  我们要从外界获得信息,必须依靠于感觉器官。但是人类的感官都是感性的去感知世界,并不能用于十分精確的科学研究与生产活动中。为了更好的发展科技水平,我们就需要依靠传感器。所以可以