目的:维生素K能够参与血凝过程,是凝血因子γ-羧化酶的辅酶,又是凝血因子2、7、9、10合成的必需物质。除了在凝血中的作用外,维生素K已被证明与生理和病理事件的多个方面有关,包括骨代谢、心血管疾病和肿瘤生物学。维生素K的缺乏会造成一系列的生理功能失调和病理性的改变。所以检测血清中维生素K的含量对人体健康至关重要。目前测定维生素K1、K2的方法主要有荧光法、化学发光法、电化学法、高效液相色谱法等,检测的方式主要是单项逐一检测,即对一种维生素进行检测。本研究的目的在于使用液相色谱串联质谱法同时测定维生素K1和维生素K2（甲萘醌-4和甲萘醌-7）的含量,可以满足临床上对于样本检测需求的精准快速的检测方法。研究方法:采用高效液相色谱-串联质谱法测定人血清中维生素K1和维生素K2（甲萘醌-4和甲萘醌-7）的定量方法。色谱条件:色谱柱:CAPCELL PAK ADME-HRS2（2.12mm*50mm）;流动相:A相:甲酸铵+甲酸+水（0.3153g+100μl+100ml）;B相:乙腈（纯）;柱温:40℃;流速:0.4ml/min;检测时间:5.0min;进样体积:20μl;采用等度洗脱,5%A:95%B。本研究采用液液萃取法来提取人血清中的维生素K,并对此方法学进行考察,并应用此方法对200例患者的血清中维生素K浓度进行了检测。结果:本研究对开发的检测方法进行了方法学验证,对方法的专属性和精密度进行考察,结果表明日内精密度和日间精密度不超过15%,并且保留时间比较短;对线性关系进行考察,线性相关系数为0.99861～0.99972,线性良好;提取回收率无明显差异,且不存在明显的基质效应;稳定性结果表示,血清在多种储存条件下,日内精密度和日间精密度均不超过15%,表明样品具备十分稳定的检测条件。本研究对200名患者送检血清样本进行了测定,测定结果K1值为0.96-1.38ng/m L;MK-4和MK-7的值分别为（0.44-1.22）ng/m L和（0.20-0.78）ng/m L。结论:本研究建立了一种能够同时对人血清中维生素K1与维生素K2（甲萘醌-4和甲萘醌-7）进行检测的方法,能够将VK1与MK4、MK7用同一方法检测,即实现了检测手段上的创新,又能以精准高效的质量为临床检测提供服务。方法学开发完成后,本研究还对方法学进行了验证,结果显示本方法能够满足所需的评定标准,且具有较高的准确性以及良好的重现性。因此,临床上能够采用本方法来检测人血清中的VK1和VK2（MK4和MK7）的含量。