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本试验研究了ZEA和ISO二者联合作用对青年母猪生殖器官发育、生殖激素分泌、肝脏损伤、肌肉和肝脏中ZEA残留和生长性能影响及相关机制。试验采用3×3两因子析因法设计,分别在日粮中添加ZEA 0、0.5、2 mg/kg和ISO 0、300、600 mg/kg。将90头75日龄的D×L×Y三元杂交青年母猪(26.50±0.60kg),随机分入9个处理组,每个处理5个重复,每个重复2头猪。试验时间为21d。主要研究结果如下:1.ZEA和ISO联合作用对青年母猪生殖器官发育和生殖激素分泌的影响。日粮中添加2 mg/kg ZEA可显著(P<0.05)增加青年母猪生殖器官重量,并可导致母猪阴户红肿。日粮中同时添加ISO和0.5 mg/kg ZEA与单独添加0.5 mg/kg ZEA处理组相比,增加了生殖器官重量和阴户宽度,但日粮中添加ISO可缓解2 mg/kg ZEA导致的生殖器官增重和阴户红肿(P<0.05)。RT-PCR和Western Blot分析表明,曰粮中添加ZEA可显著增加子宫和阴道组织中ERa表达而降低ERβ的表达(P<0.05)。日粮中添加ISO可抑制ZEA诱导的ERa表达升高,并增加ERβ的表达(P<0.05)。对青年母猪的血清中生殖激素浓度的检测分析表明,日粮中同时添加ZEA和ISO增加了第7d和14d青年母猪血清中E2的水平,但在21d时降低了E2的水平(P<0.05)。同时添加2 mg/kg ZEA和600 mg/kg ISO处理组的母猪在第7d、14d和21d时均有最高的FSH水平(P<0.05)。ZEA和ISO联合作用显著影响了母猪的LH水平(P<0.05),在14d和21d,同时添加2 mg/kg ZEA和600 mg/kg ISO处理组母猪的LH水平最低。RT-PCR分析表明,日粮中同时添加ZEA和ISO,上调了下丘脑中ERs和垂体中GnRH受体的mRNA表达(P<0.05)。以上结果表明,ISO可以缓解高浓度的ZEA (2 mg/kg)的雌激素毒性,二者联合作用通过调节下丘脑ERs和垂体GnRH受体的表达来影响青年母猪生殖激素的正常分泌,并调节生殖器官ERs的表达,进而影响青年母猪生殖器官的发育。2.ZEA和ISO联合作用对青年母猪肝脏功能和氧化损伤的影响。日粮中添加2mg/kg ZEA可显著导致青年母猪肝脏肝小叶间质增生,外周带肝细胞肿胀、水泡变性,ISO可缓解2 mg/kg ZEA导致的肝脏组织病变。日粮中同时添加ZEA和ISO在14d时增加了血清中AST、ALT和ALP的水平(P<0.05),但这三种酶的水平在7d、14d和21d时逐渐降低(P<0.05)。日粮中单独添加ZEA、ISO对青年母猪血清中TB、ALB和Glob浓度无显著影响(P>0.05)。和对应的单独添加ZEA处理组相比,ZEA和ISO联合添加组21d时显著(P<0.05)增加了血清中ALB的水平。日粮中同时添加ZEA和ISO对IgG和IgM浓度无显著影响。ZEA显著增加了母猪血清中MDA浓度,而降低了SOD和GSH-Px的浓度(P<0.05)。ISO对MDA、SOD和GSH-Px的影响正好与ZEA相反。结果表明,日粮中添加ISO可以缓解曰粮中2 mg/kg ZEA导致的肝脏毒性和氧化损伤。3.ZEA和ISO联合作用对青年母猪肌肉和肝脏ZEA残留的影响。在21d试验结束时测定肌肉和肝脏中ZEA含量,发现肝脏和肌肉中ZEA含量随着日粮中ZEA浓度的增加而显著增加(P<0.05),而日粮中添加ISO可显著降低肌肉和肝脏中ZEA含量(P<0.05)。基础曰粮组、单独添加0.5和2 mg/kg ZEA处理组的母猪肝脏中ZEA残留量分别为26.31 ng/kg、291.14 ng/kg和1352.06 ng/kg,母猪肌肉中ZEA残留量分别为8.51 ng/kg、9.71 ng/kg和31.30 ng/kg。日粮中同时添加ISO和ZEA与对应的单独添加ZEA组相比,肝脏和肌肉中ZEA残留量显著降低了(P<0.05),但ISO和2 mg/kg ZEA联合添加组肝脏和肌肉中ZEA残留量仍显著(P<0.05)高于基础日粮组。试验分析了日粮中ZEA和ISO联合作用对肝脏中3α/3β-HSD表达情况的影响。日粮中ZEA和ISO均可增加3α/3β-HSD mRNA的表达,但影响不显著(P>0.05)。日粮中ZEA显著(P<0.05)增加了肝脏中3α/3β-HSD蛋白的表达,而ISO对3α/3β-HSD蛋白表达影响不显著(P>0.05)。日粮中ZEA和ISO联合作用对3α/3β-HSD mRNA和蛋白的表达影响显著(P<0.05)。结果表明,ISO可显著降低肌肉和肝脏中ZEA的残留量,其可能的机制是通过抑制ZEA向α-ZEA转化,而加速ZEA及其代谢产物向和葡萄糖醛酸形成共轭化合物的方向转化,这也可能是ISO可以降低日粮中高剂量ZEA的雌激素毒性的原因之一4.ZEA和ISO联合作用对青年母猪生长性能和其他器官发育的影响。在本试验中,日粮中单独添加ZEA和ISO或二者同时添加对青年母猪的平均日增重、平均日采食量和饲料转换效率影响均不显著(P>0.05)。日粮中添加ZEA显著降低了青年母猪血清中T3水平(P<0.05),而对GH和T4浓度无显著影响(P>0.05)。曰粮中添加ISO显著增加了母猪血清中GH和T3水平(P<0.05)。二者联合作用对青年母猪血清中GH、T3和T4浓度无显著影响(P>0.05)。日粮中添加ZEA和ISO及二者联合作用对青年母猪心脏、肺脏、脾脏、肝脏和肾脏的相对重量影响不显著(P>0.05)。结果表明,日粮中添加0.5-2 mg/kg的ZEA和300-600 mg/kg的ISO在21d的试验期间对青年母猪生长性能及心脏、肺脏、脾脏、肝脏和肾脏的相对器官重量无显著影响(P>0.05)。综合上述试验结果,本研究得出以下结论:[1]ISO可减弱日粮中高浓度ZEA(2 mg/kg)对青年母猪的雌激素样作用,而增强日粮中低浓度ZEA (0.5 mg/kg)对青年母猪的雌激素样作用,ISO表现出双相雌激素调节作用。ZEA和ISO联合作用干扰了生殖激素的分泌,并影响生殖器官的ERs表达,进而调控生殖器官的发育;(2)ISO可以缓解ZEA对青年母猪造成的肝脏损伤和氧化应激;(3)ISO可以降低ZEA在青年母猪肝脏和肌肉中的残留,其可能的机制是ISO加快了ZEA的代谢;(4)本试验条件下,ZEA和ISO单独或联合作用对青年母猪的生长性能无明显不良影响,对青年母猪肺脏、心脏、脾脏和肾脏也无显著损伤。